Die sleutelverskil tussen isokratiese en gradiënt-elutie is dat isokratiese elutie verwys na die handhawing van 'n konstante konsentrasie in die mobiele fase, terwyl gradiënt-elutie verwys na die handhawing van 'n wisselende konsentrasie in die mobiele fase.
Die terme isokraties en gradiënt-eluering word in chromatografie gebruik. Tydens 'n chromatografiese lopie gebruik ons 'n stilstaande fase, wat 'n nie-bewegende stof is, saam met 'n mobiele fase, die bewegende stof. Die isokratiese en gradiënt-elutie beskryf die eienskappe van die mobiele fase.
Wat is isokratiese eluering?
Isokratiese eluering is 'n term wat in chromatografie gebruik word wanneer die mobiele fase 'n konstante konsentrasie het. Hier is die konsentrasie van die mobiele fase konstant regdeur die chromatografiese proses. In hierdie proses kan ons die piekwydte met retensietyd lineêr in die chromatogram waarneem wat toeneem. Dit lei egter tot 'n nadeel - die laat-eluerende pieke vir laat elutie word baie plat en breed. Daarom word hierdie breë pieke moeilik om as pieke erken te word.
Boonop, in isokratiese eluering, verander die selektiwiteit nie volgens die kolomafmetings nie. Dit beteken die selektiwiteit hang nie af van die veranderinge in kolomafmetings nie. Hier word die lengte en deursnee as kolomafmetings beskou. Daarom elueer die pieke in dieselfde volgorde.
Wat is gradiënt-elutie?
Gradient-eluering is 'n term wat in chromatografie gebruik word wanneer hier die mobiele fase 'n wisselende konsentrasie het. Met ander woorde, die konsentrasie van die mobiele fase hoef nie konstant te bly nie. Byvoorbeeld, in HPLC gebruik 'n algemene skeidingsmetode aanvanklik metanol 10% en eindig by 90%, deur die konsentrasie geleidelik te verhoog. Die mobiele fase het twee komponente: 'n swak oplosmiddel en 'n sterk oplosmiddel. Swak oplosmiddel laat die opgeloste stof stadig elueer terwyl sterk oplosmiddel die vinnige eluering van die opgeloste stof veroorsaak. In omgekeerde fase chromatografie gebruik ons water as die swak oplosmiddel en organiese oplosmiddel as die sterk oplosmiddel.
Figuur 01: HPLC
Boonop verminder die gradiënt-elueringsmetode die later eluerende komponente om hulle vinniger te laat elueer, wat 'n nou piek in die chromatogram gee. Hierdie metode verbeter ook die piekvorm en die piekhoogte. Verder, in gradiënt-elueringstegniek, verander die elueringsvolgorde met die veranderinge in kolomafmetings.
Wat is die verskil tussen isokratiese en gradiënt-elutie?
Die terme isokraties en gradiënt-eluering word in chromatografie gebruik. Isokratiese en gradiënt-elutie beskryf die eienskappe van die mobiele fase. Die sleutelverskil tussen isokratiese en gradiënt-elutie is dat isokratiese elutie verwys na die handhawing van 'n konstante konsentrasie in die mobiele fase, terwyl gradiënt-elutie verwys na die handhawing van 'n wisselende konsentrasie in die mobiele fase.
In die isokratiese elueringstegniek neem die piekwydte lineêr toe met die retensietyd. In die gradiënt-elueringstegniek word die retensie van die later-eluerende komponente egter verminder, sodat die eluering vinniger word en smal pieke gee. Afgesien daarvan, in die isokratiese elutie, hang selektiwiteit nie af van die kolomdimensies nie, maar in gradiënt-elutie verander die selektiwiteit met veranderende kolomdimensies.
Die volgende tabel som die verskil tussen isokratiese en gradiënt-eluering op.
Opsomming – Isokratiese vs Gradiënt-elutie
Isokratiese elutie en gradiënt elutie beskryf die eienskappe van die mobiele fase. Die sleutelverskil tussen isokratiese en gradiënt-elutie is dat isokratiese elutie verwys na die handhawing van 'n konstante konsentrasie in die mobiele fase, terwyl gradiënt-elutie verwys na die handhawing van 'n wisselende konsentrasie in die mobiele fase.
