Sleutelverskil – vloeisitometrie vs FACS
In die konteks van selleorie is selle die basiese strukturele en funksionele eenheid van alle lewende organismes. Selsortering is 'n metodologie wat gebruik word om verskillende selle te skei volgens die fisiologiese en morfologiese kenmerke. Hulle kan intrasellulêre of ekstrasellulêre eienskappe hê. Interaksie van DNA, RNA en proteïene word as intrasellulêre interaktiewe eienskappe beskou, terwyl die vorm, grootte en verskillende oppervlakproteïene as ekstrasellulêre eienskappe beskou word. In die hedendaagse wetenskap het selsortering-metodologieë daartoe gelei dat die verskillende ondersoeke in biologiese studies en ook in die vestiging van nuwe beginsels deur navorsing oor medisyne help. Selsortering word uitgevoer volgens verskeie metodologieë wat beide primitiewe met minder toerusting en gevorderde tegnologiese metodologieë met die gebruik van gesofistikeerde masjinerie insluit. Vloeisitometrie, fluoresserende geaktiveerde selsortering (FACS), magnetiese seleksie en enkelselsortering is die belangrikste metodologieë wat gebruik word. Vloeisitometrie en FACS word ontwikkel om selle volgens hul optiese eienskappe te differensieer. FACS is 'n gespesialiseerde tipe vloeisitometrie. Vloeisitometrie is 'n metodologie wat gebruik word tydens ontleding van 'n heterogene populasie van selle volgens verskillende seloppervlakmolekules, grootte en volume wat die ondersoek van enkelselle moontlik maak. FACS is 'n proses waardeur 'n monstermengsel van selle volgens hul ligverstrooiings- en fluoressensie-eienskappe in twee of meer houers gesorteer word. Dit is die sleutelverskil tussen vloeisitometrie en FACS.
Wat is vloeisitometrie?
Vloeisitometrie is 'n metode wat gebruik word om die uitdrukking van intrasellulêre molekules en die seloppervlak te ondersoek en te bepaal en om verskillende seltipes te definieer en te karakteriseer. Dit word ook gebruik om die selvolume en selgrootte te bepaal en om die suiwerheid van subpopulasies wat geïsoleer is, te evalueer. Dit laat die multi-parameter evaluering van enkelselle op ongeveer dieselfde tyd toe. Vloeisitometrie word gebruik om die intensiteit van fluoressensie te meet wat geproduseer word as gevolg van fluoresserend gemerkte teenliggaampies wat help om proteïene of ligande te identifiseer wat aan geassosieerde selle bind.
Figuur 01: Vloeisitometrie
Oor die algemeen sluit vloeisitometrie hoofsaaklik drie substelsels in. Dit is die vloeistowwe, die elektronika en die optika. In vloeisitometrie is vyf hoofkomponente beskikbaar wat in selsortering gebruik word. Hulle is 'n vloeisel ('n stroom vloeistof wat gebruik word om hulle te vervoer en die selle in lyn te bring vir optiese waarnemingsproses), 'n stelsel van meting (kan van verskillende stelsels wees, insluitend kwik- en xenonlampe, hoëkrag-waterverkoelde of lae krag lugverkoelde lasers of diode lasers), 'n ADC; Analoog na digitaal omsetterstelsel, versterkingstelsel en 'n rekenaar vir ontleding. Die verkryging is die proses waardeur die data van die monsters ingesamel word met behulp van vloeisitometer. Hierdie proses word bemiddel deur 'n rekenaar wat met die vloeisitometer verbind is. Die sagteware wat in die rekenaar teenwoordig is, ontleed die inligting wat vanaf die vloeisitometer na die rekenaar gevoer word. Die sagteware het ook die vermoë om parameters van die eksperiment wat die vloeisitometer beheer, aan te pas.
Wat is FACS?
In die konteks van vloeisitometrie, is fluoressensie-geaktiveerde selsortering (FACS) 'n metode wat gebruik word om 'n monster van 'n mengsel van biologiese selle te differensieer en te sorteer. Die selle word van twee of meer houers geskei. Die sorteermetode is gebaseer op die fisiese kenmerke van die sel wat ligverstrooiing en fluoressensie-eienskappe van die sel insluit. Dit is 'n belangrike wetenskaplike tegniek wat gebruik kan word om betroubare kwantitatiewe en kwalitatiewe resultate te verkry van fluoressensie seine wat uit elke sel uitgestraal word. Tydens FACS, aanvanklik, die voorafverkryde mengsel van selle; 'n suspensie word na die middel van 'n nou stroom vloeistof gerig wat vinnig vloei. Die vloeistofvloei is ontwerp om die selle in die suspensie te skei op grond van die deursnee van elke sel. 'n Vibrasiemeganisme word op die suspensiestroom toegepas wat lei tot die vorming van individuele druppels.
Figuur 02: FACS
Die stelsel is gekalibreer om 'n enkele druppel met een sel te skep. Net voor die vorming van druppels, beweeg die vloeisuspensie langs 'n fluoressensie-meetapparaat wat die fluoressensie-kenmerk van elke sel opspoor. By die punt van vorming van druppels word 'n elektriese laairing geplaas wat 'n lading na die ring geïnduseer word voor die meting van die intensiteit van fluoressensie. Sodra die druppels uit die suspensiestroom gevorm is, word 'n lading binne die druppels vasgevang wat dan in 'n elektrostatiese defleksiestelsel ingaan. Volgens die aanklag herlei die stelsel die druppels na verskillende houers. Die metode van toepassing van die heffing verskil volgens verskillende stelsels wat in FACS gebruik word. Die toerusting wat in FACS gebruik word, staan bekend as 'n fluoressensie-geaktiveerde sel-sorteerder.
Wat is die ooreenkoms tussen vloeisitometrie en FACS?
Vloeisitometrie en FACS is ontwikkel om selle volgens hul optiese eienskappe te onderskei
Wat is die verskil tussen vloeisitometrie en FACS?
Vloeisitometrie vs FACS |
|
| Vloeisitometrie is 'n metodologie wat gebruik word tydens ontleding van 'n heterogene populasie van selle volgens verskillende seloppervlakmolekules, grootte en volume wat die ondersoek van enkelselle moontlik maak. | FACS is 'n proses waardeur 'n monstermengsel van selle volgens hul ligverstrooiings- en fluoressensie-eienskappe in twee of meer houers gesorteer word. |
Opsomming – Vloeisitometrie vs FACS
Die sel is die basiese strukturele en funksionele eenheid van alle lewende organismes. Selsortering is die proses waardeur selle geïsoleer en in verskillende kategorieë gedifferensieer word op grond van hul intrasellulêre en ekstrasellulêre eienskappe. Vloeisitometrie en FACS is twee belangrike metodologieë in selsortering. Beide prosesse is ontwikkel om selle te onderskei volgens hul optiese eienskappe. Vloeisitometrie is 'n metodologie wat gebruik word tydens ontleding van 'n heterogene populasie van selle volgens verskillende seloppervlakmolekules, grootte en volume wat die ondersoek van enkelselle moontlik maak. FACS is 'n proses waardeur 'n monstermengsel van selle volgens hul ligverstrooiings- en fluoressensie-eienskappe in twee of meer houers gesorteer word. Dit is die verskil tussen vloeisitometrie en FACS.
Laai die PDF-weergawe van Flow Cytometry vs FACS af
Jy kan die PDF-weergawe van hierdie artikel aflaai en dit vir vanlyn doeleindes gebruik soos per aanhalingsnota. Laai asseblief PDF-weergawe hier af Verskil tussen vloeisitometrie en FACS
