Sleutelverskil – Primêre vs Sekondêre Selkultuur
Voordat ons die verskil tussen primêre en sekondêre selkultuur bespreek, laat ons eers kortliks definieer wat selkultuur is. Selkultuur is die proses om selle van 'n dier of plant te verwyder en daaropvolgende groei in 'n kunsmatig beheerde omgewing. Die selle kan direk uit die weefsel verwyder word en deur ensiematiese of meganiese metodes gedisaggregeer word of kan afgelei word van 'n kultuur wat reeds gevestig is. Die sleutelverskil tussen primêre en sekondêre selkultuur is dat selle vir primêre selkultuur direk van 'n dier- of plantweefsel verkry word, terwyl selle vir sekondêre selkultuur uit 'n reeds gevestigde primêre kultuur verkry word. Daarom is sekondêre kultuur 'n nuwe kultuur wat uit die primêre kultuur ontstaan het.
Kom ons kyk verder na die betekenis van primêre en sekondêre selkultuur om hulle beter te onderskei.
Wat is primêre selkultuur?
Primêre selkultuur is die disassosiasie van selle van 'n ouerlike dier of plantweefsel deur ensiematiese of meganiese maatreëls en die handhawing van die groei van selle in 'n geskikte substraat in glas- of plastiekhouers onder beheerde omgewingstoestande. Selle in primêre kultuur het dieselfde kariotipe (aantal en voorkoms van chromosome in die kern van 'n eukariotiese sel) as daardie selle in die oorspronklike weefsel. Primêre selkultuur kan in twee geklassifiseer word op grond van die soort selle wat in kultuur gebruik word.
Vankering-afhanklike of aanhangende sel – Hierdie selle benodig 'n aanhegting vir groei. Aanhangende selle word gewoonlik afkomstig van weefsels van organe, byvoorbeeld van niere waar die selle onbeweeglik is en in bindweefsel ingebed is
Anchorage Independent of Suspension Cells – Hierdie selle benodig nie 'n aanhegting vir groei nie. Met ander woorde, hierdie selle heg nie aan die oppervlak van die kultuurvat nie. Alle suspensiekulture is afkomstig van selle van die bloedstelsel; witbloedsellimfosiete word byvoorbeeld in plasma gesuspendeer
Selle afkomstig van primêre kulture het 'n beperkte lewensduur. Selle kan om verskeie redes nie onbepaald gehou word nie. Toenemende selgetalle in primêre kultuur sal lei tot uitputting van substraat en voedingstowwe. Ook sal sellulêre aktiwiteit die vlak van toksiese metaboliete in die kultuur geleidelik verhoog wat verdere selgroei inhibeer.
Op hierdie stadium moet 'n sekondêre of 'n subkultuur uitgevoer word om deurlopende selgroei te verseker.
Wat is sekondêre selkultuur?
Soos hierbo beskryf, wanneer selle in aanhangende kulture alle beskikbare substraat beset of wanneer selle in suspensiekulture die kapasiteit van die medium oorskry om verdere groei te ondersteun, begin selproliferasie verminder of heeltemal ophou. Om optimale seldigtheid vir voortgesette groei te handhaaf en om verdere proliferasie te stimuleer, moet primêre kultuur gesubkultuur word. Hierdie proses staan bekend as sekondêre selkultuur.
Tydens die sekondêre selkultuur word selle van primêre kultuur oorgeplaas na 'n nuwe houer met vars groeimedium. Die proses behels die verwydering van die vorige groeimedia en die disassosiasie van aangehegte selle in aanhangende primêre kulture. Sekondêre selkweek word periodiek vereis om selle van groeiruimte en vars voedingstowwe te voorsien, waardeur die lewe van selle verleng word en 'n aantal selle in die kultuur uitbrei.
Sekondêre kweek van 'n sekere volume van 'n primêre kultuur in 'n gelyke volume vars groeimedium laat langtermyn instandhouding van sellyne toe. Sekondêre verbouing in 'n groter volume vars groeimedium word beoefen om die aantal selle te verhoog, byvoorbeeld in industriële prosesse of wetenskaplike eksperimente.
Wat is die verskil tussen primêre selkultuur en sekondêre selkultuur?
Soos ons nou die twee terme afsonderlik verstaan het, sal ons die twee vergelyk om ander verskille tussen hulle te vind.
Wanneer om primêre en/of sekondêre selkultuur te gebruik
Dit hang af van wat jy wil leer en watter tipe eksperiment jy uitvoer.
Primêre Selkultuur: Dit is die proses wat gebruik moet word om selle van die ouerweefsel wat bekommerd is, te kweek. Selle in primêre kultuur sal 'n eindige lewensduur hê as gevolg van uitputting van substraat en voedingstowwe en opbou van gifstowwe, met bevolkingsgroei. Primêre kultuur, ten spyte van die skeidingstegnieke wat in die isolasieproses gebruik word, kan verskeie tipes selle bevat. Dit mag egter nie 'n probleem in alle tipe eksperimente wees nie en in sulke gevalle kan primêre kultuur alleen gebruik word.
Sekondêre Selkultuur: Gewoonlik is die aantal selle wat uit primêre kultuur verkry word, onvoldoende in eksperimente. Sekondêre selkultuur bied die geleentheid om selpopulasie uit te brei en ook om lewensduur te verleng. Dit maak verdere seleksie van selle moontlik met die gebruik van 'n selektiewe medium en laat genotipiese en fenotipiese eenvormigheid in die populasie toe. Hierdie proses word gebruik om replikaatkulture te genereer vir basiese karakterisering, bewaring en eksperimentering.
Oorgelykenis met ouerweefsel
Primêre Selkultuur: Selle vir primêre selkultuur word direk van 'n dier- of plantweefsel verkry. Selle in primêre kultuur lyk dus baie na sy ouerweefsel en dienooreenkomstig kan die biologiese reaksie nader aan 'n in vivo situasie wees as dié van 'n sekondêre selkultuur.
Sekondêre Selkultuur: Sekondêre selkultuur is afkomstig van 'n primêre selkultuur. Alhoewel sub-kweek die lewensduur van selle verleng, is daar die moontlikheid dat selle na 'n paar fases getransformeer kan word of beheer kan verloor om nie meer as 'n sekere aantal kere te verdeel nie. Dit kan wees as gevolg van mutasies of genetiese veranderinge in primêre selle tydens sub-kweek. Sommige mikroörganismes is byvoorbeeld geneig om aan te pas by kultuurtoestande, wat meestal verskil van hul natuurlike omgewing, deur hul biologie te verander.
Proses van kweek – Verkryging van selle
Primêre Selkultuur: In primêre selkultuur sal dier- of plantweefsel fases van spoel, disseksie en meganiese of ensiematiese disaggregasie gaan. Gedisaggregeerde weefsel sal 'n verskeidenheid verskillende seltipes bevat, en dit kan die aanvaarding van 'n skeidingstegniek vereis om selle van belang te isoleer.
Sekondêre Selkultuur: In sekondêre selkultuur, as die primêre kultuur 'n aanhangende kultuur is, is die eerste stap om selle los te maak van die aanhegting (oppervlak van kultuurvat) deur meganiese of ensiematiese middele. Dan moet die selle van mekaar losgemaak word om 'n enkelselsuspensie te vorm.
Aantal selle in kultuur
Primêre Selkultuur: Dit is nie wenslik om 'n absolute enkelselsuspensie te hê nie, aangesien baie primêre selle beter in klein trosse oorleef.
Sekondêre Selkultuur: Dit is voldoende om 'n enkelselsuspensie te genereer.
Lewensduur van kultuur
Primêre selkultuur: Primêre selkulture het eindige lewensduur. Soos hierbo verduidelik, is dit omdat die groei van selle substraat en voedingstowwe uitput en lei tot ophoping van toksiese metaboliete. Gevolglik daal die groeitempo van selle geleidelik, wat lei tot die dood van selle.
Sekondêre Selkultuur: Sekondêre selkultuur verleng die lewensduur van selle. Periodieke sub-kweek kan onsterflike selle produseer deur transformasie of genetiese verandering van primêre selle.
Risiko van kontaminasie
Primêre selkultuur: Dit is moeiliker om vir primêre selkulture te sorg. Oor die algemeen benodig primêre selkulture 'n ryk mengsel van aminosure, mikrovoedingstowwe, sekere hormone en groeifaktore. Gevolglik is die risiko van kontaminasie in primêre selkulture hoër as sekondêre selkulture.
Sekondêre Selkultuur: Sekondêre selkulture is relatief maklik om te onderhou, en die risiko van kontaminasie is laer as primêre selkulture.
In hierdie artikel het ons probeer om die terme primêre selkultuur en sekondêre selkultuur te verstaan, gevolg deur 'n vergelyking om sleutelverskille tussen hulle uit te lig. Die basiese verskil lê in hoe selle van kultuur afgelei word; selle vir primêre selkultuur word direk van 'n dier- of plantweefsel verkry, terwyl selle vir sekondêre selkultuur uit 'n reeds gevestigde primêre kultuur verkry word.
