Sleutelverskil – CFU vs MPN
Kolonievormende eenheid (CFU) en Mees waarskynlike getal (MPN) is twee metodes wat gebruik word om mikroörganismes in monsters op te tel. Beide parameters word gebruik om waterkwaliteit en fekale indikatorbakterieë in watermonsters op te spoor. Kolonievormende eenheid is 'n maatstaf wat gebruik word om die aantal lewensvatbare bakteriële selle of swamselle in spesifieke volume of gewig van 'n gegewe monster op te tel. Die standaardeenheid vir hierdie parameter is CFU/ml of CFU/g. Mees waarskynlike getal is 'n ander eenheid wat gebruik word om die aantal lewensvatbare bakteriële selle in 'n vloeibare monster te meet. Die belangrikste verskil tussen CFU en MPN is dat CFU bereken word uit die bakteriese en swamkolonies wat op 'n soliede agarplaat groei, terwyl MPN bereken word uit lewensvatbare bakterieë wat in 'n vloeibare medium groei.
Wat is CFU?
Kolonievormende eenheid (CFU) is 'n parameter wat die aantal lewensvatbare bakteriese of swamselle in 'n gegewe monster meet. Die metode wat kolonievormende eenhede tel, word standaardplaattelling genoem. Die lewensvatbare kolonies wat op die agarplate voorkom word uitgedruk as CFU per 1 ml (kolonievormende eenheid per milliliter) van die monster vir vloeistowwe of CFU per 1 g (kolonievormende eenheid per een gram) van die monster vir vaste stowwe.
Daar is twee algemene metodes wat gebruik word om CFU in 'n monster te meet. Hulle is versprei plaat metode en gooi plaat metode. Hierdie twee metodes word ondersteun deur 'n tegniek genaamd reeksverdunning. Serieverdunde monsters maak dit moontlik om 'n telbare aantal kolonies op die agaroppervlak te verkry. 'n Bekende volume monster kan op die oppervlak van 'n agarplaat versprei word, of met agar gemeng en op 'n bord gegooi word. Die plaat word dan geïnkubeer en die ontstaande kolonies word getel. Die aantal kolonies hou verband met die aantal mikroörganismes binne die oorspronklike monster. Die plate wat te veel kolonies of te min kolonies toon, word uitgesluit van telling omdat die resultate dalk nie statisties akkuraat is op daardie plate nie. Statisties is die beste reeks 30 – 300 kolonies op 'n agarplaat. Daarom moet die korrekte plate gekies word vir akkurate opsomming. Serieverdunning word vir die bogenoemde funksie uitgevoer.
Sodra jy die aantal lewensvatbare kolonies op plate getel het, kan CFU/ml met behulp van die volgende vergelyking bereken word.
CFU per ml oorspronklike monster=aantal kolonies op 'n plaat X verdunningsfaktor
Verdunningsfaktor=(1/ Verdunning van die plaat)
Byvoorbeeld, as jy 149 kolonies op die plaat van die 10-4 verdunning kry, dan kan die aantal bakterieë in 1 ml van die oorspronklike monster soos volg bereken word:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 of 1490000
=1. 49 x 106
Figuur 01: Kolonievormingseenheid
Wat is MPN?
Die mees waarskynlike getal is 'n alternatiewe maatstaf vir CFU/ml. MPN skat ook die lewensvatbare selle in 'n vloeibare monster. Dit tel organismes wat in 'n vloeibare kultuur groei en is 'n oorwegend bakteriologiese tegniek. Hierdie metode is veral nuttig vir monsters wat lae konsentrasies bakteriële selle bevat; byvoorbeeld melk, drinkbare water, ens. MPN-waarde word uitgedruk vir 100 ml volume. MPN maak staat op 'n statistiese metode gebaseer op waarskynlikheidsteorie. Daar is statistiese tabelle wat ontwerp is om MPN-waardes per 100 ml van die monster te vind. Hierdie tabelle wys die resultate teen 95% vertrouenslimiete.
MPN-waarde word bereken nadat 'n tegniek genaamd meervoudige buisfermentasiemetode uitgevoer is. Drie stelle buise wat 'n geskikte kultuurmedium bevat, word geënt met drie verskillende volumes van die monster soos 10 ml, 1 ml en 0.1 ml en geïnkubeer vir die groei. Na die inkubasietydperk word buisies + (positief) of – (negatief) vir die teenwoordigheid of afwesigheid van groei gemerk. Die patroon van positiewe en negatiewe resultate word dan vergelyk met 'n MPN-tabel van statistiese waarskynlikhede om die aantal mikroörganismes te skat. Dan word MPN-waarde gegee vir 100 ml van die monster. MPN word wyd gebruik om koliforme bakterieë wat in watermonsters voorkom op te spoor.
Figuur 02: MPN-tabel
Wat is die verskil tussen CFU en MPN?
CFU vs MPN |
|
| CFU is 'n maatstaf wat gebruik word om die aantal lewensvatbare bakteriese of swamkolonies in 'n gegewe monster uit te druk. | MPN is 'n alternatiewe maatstaf vir CFU en meet die aantal lewensvatbare bakteriese selle in 'n vloeibare monster. |
| Unit | |
| CFU/ml of CFU/g | MPN/100 ml |
| Berekening | |
| CFU word bereken deur die aantal kolonies te tel wat op agarplate gegroei is. | MPN word bereken deur positiewe en negatiewe patrone van die buise met MPN statistiese tabel te vergelyk. |
| Seriële verdunningstegniek | |
| Seriële verdunning word uitgevoer voordat die monsters op agarplate geplaas word. | Seriële verdunning word nie normaalweg uitgevoer wanneer MPN bereken word nie |
| Metodes | |
| Smeerplaatmetode en gietplaatmetode is twee tipes metodes wat uitgevoer word om CFU te verkry. | Meervoudige buisfermentasie is die metode wat uitgevoer word om MPN-waarde te verkry. |
Opsomming – CFU vs MPN
Om die mikrobiese groei te meet word om baie redes vereis. In voedselverwerkingsaanlegte is dit nodig om die vlak en tipe mikroörganismes in voedsel te meet. In die voedselindustrie en medisyne is dit nodig om te verseker dat sterilisasiebehandelings effektief toegepas word. In rioolsuiweringsaanlegte is dit nodig om mikrobiese tellings gereeld te neem. Wanneer die prosedure in molekulêre biologie geoptimaliseer word, is dit nodig om die aantal kolonies op plate te meet. Daarom is daar verskillende opsommings- en groeimetingsmetodes beskikbaar. CFU en MPN is twee sulke metodes wat wyd in verskillende velde gebruik word. CFU is 'n maatstaf van die aantal lewensvatbare bakteriese en swamkolonies wat in 'n gegewe monster teenwoordig is. Dit word bereken deur gebruik te maak van standaard plaattelmetode of lewensvatbare plaattelmetode. MPN is 'n ander maatstaf wat die aantal bakteriese selle wat in 'n gegewe volume van die vloeistofmonster teenwoordig is, uitdruk. Dit word bereken deur gebruik te maak van meervoudige buisfermentasiemetode en MPN-tabel. Dit is die verskil tussen CFU en MPN.
Laai PDF-weergawe van CFU vs MPN af af
Jy kan die PDF-weergawe van hierdie artikel aflaai en dit vir vanlyn doeleindes gebruik soos per aanhalingsnotas. Laai asseblief PDF-weergawe hier af Verskil tussen CFU en MPN.
