Sleutelverskil – RPMI vs DMEM
Die meeste navorsingstudies behels die kweek van dieresel en dus vereis hierdie studies instandhouding van diersellyne onder spesiale groeitoestande. Diereselkweek word wyd uitgevoer in farmakologiese studies om geneesmiddelmetabolisme te identifiseer, in siektediagnostiek en in kankernavorsing. Die selkultuurmedia is 'n belangrike aspek van dierselkultuur. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) en Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) is twee kultuurmedia wat in dierselkweek gebruik word. RPMI is 'n medium wat wyd gebruik word om soogdierselle in suspensiekultuur te kweek. DMEM is 'n aangepaste tipe basale medium, met verhoogde aminosuur- en vitamienkonsentrasies tot viervoudig. DMEM word gebruik in die kweek van selle in aanhangende kulture. Die belangrikste verskil tussen die twee media is die tipe kultuur van die media. RPMI word op suspensiekulture gebruik, terwyl DMEM gebruik word om adherente selle te kweek.
Wat is RPMI?
RPMI of Roswell Park Memorial Institute Medium word ook na verwys as RPMI 1640. Die naam van die media is afgelei deur die instituut waarin die media ontdek is. Hierdie media word algemeen in diereselkultuur gebruik, veral vir die groei van soogdierselle. Hulle is oorspronklik ontwikkel om menslike limfosiete te laat groei.
Die volgende bestanddele is by die RPMI ingesluit.
- Glucose
- pH-aanwyser (fenolrooi)\
- Soute (natriumchloried, natriumbikarbonaat, dinatriumfosfaat, kaliumchloried, magnesiumsulfaat en kalsiumnitraat)
- Aminosure
- Vitamiene (i-inositol, cholienchloried, para-aminobensoësuur, foliensuur, nikotinamied, piridoksienhidrochloried, tiamienhidrochloried, kalsiumpantotenaat, biotien en riboflavien, sianokobalamien)
Die spesiale kenmerk van RPMI is die verhoogde konsentrasie fosfaat in die medium. RPMI word gebruik in 'n 5% koolstofdioksied atmosfeer. Dit sal die maksimum en optimale toestande vir die selgroei verskaf. Die pH van die media word deur die bikarbonaatbufferstelsel op 8.0 gehandhaaf.
Figuur 01: Selkultuur op 'n Petri-skottel
Toepassings van RPMI in selverbouing
- Verbouing van menslike T- en B-limfosiete, Beenmurgselle en hibridoom.
- Gebruik om menslike neoplastiese selle te bestudeer.
Wat is DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) is 'n gewysigde medium wat kommersieel voorberei word. Die oorspronklike tekstuur van die medium poeier is geel. In DMEM word vitamienkonsentrasie tot viervoudig verhoog en sodoende die voedingstofinhoud in die medium verhoog.
DMEM word ook gewysig deur meer soute soos ysternitraat, natriumpiruvaat en 'n paar nie-essensiële aminosure soos serien en glisien by te voeg. Die formulering van glukose in die media word ook verander. Die oorspronklike formulering is saamgestel uit 1000 mg/L glukose, terwyl die konsentrasie in DMEM tot 4500 mg/L verhoog word. DMEM vereis ook aanvulling van 'n serummedium aangesien dit nie 'n volledige medium is nie. Meestal word DMEM aangevul met Fetal Bovine Serum (FBS). FBS verskaf die vereiste proteïene en groeifaktore vir die verbouingsproses.
Die pH van die medium wissel na toevoeging van natriumbikarbonaat. pH van die medium voor toevoeging van natriumbikarbonaat is ongeveer 6,80 – 7,40, terwyl die pH na byvoeging van natriumbikarbonaat in die reeks van 7,60 – 8,20 lê. Die bergingstemperatuur van die medium is 2 – 8 0C.
Figuur 02: DMEM
Aansoeke van DMEM
- Om die plaakvormende vermoë van die poliomavirus in muis-embrioniese selle te bestudeer.
- In kontak inhibisie studies.
- In navorsing en ontleding van hoenderselkulture.
Wat is die ooreenkomste tussen RPMI en DMEM?
- Beide RPMI en DMEM word in dierselkultuur gebruik.
- Beide RPMI en DMEM media is vloeibare formulerings.
- Beide RPMI en DMEM media bevat die essensiële aminosure, vitamiene en anorganiese soute wat nodig is vir groei.
- Beide RPMI- en DMEM-media is onvolledig. Daarom moet serum bygevoeg word.
- Beide RPMI en DMEM media gebruik glukose as sy koolstofbron.
- Beide RPMI en DMEM media het 'n hoër pH.
Wat is die verskil tussen RPMI en DMEM?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI is 'n medium wat wyd gebruik word om soogdierselle in 'n suspensiekultuur te kweek. | DMEM is 'n aangepaste tipe basale medium met verhoogde aminosuur- en vitamienkonsentrasies. |
| Teenwoordigheid van ekstra fosfate | |
| Aanwesig in RPMI. | Afwesig in DMEM. |
| Gebruik | |
|
Gebruik om selle in aaneenlopende kulture te kweek. Dit is gewoond aan
|
| Types of Culture | |
| RPMI word vir suspensiekulture gebruik. | DMEM word gebruik vir kulture met sel aangeheg. |
Opsomming – RPMI vs DMEM
Beide RPMI en DMEM word wyd gebruik in diersel kweek veral om dier sellyne insluitend limfosiete in vitro te kweek. DMEM is 'n gemodifiseerde basale medium waar daar 'n verhoogde voedingstofkonsentrasie is. RPMI ontwikkel deur Roswell Park Memorial Institute, en dit is ook 'n medium wat gebruik word in diersel verbouing veral vir soogdier limfosiete. Beide media is kommersieel beskikbaar. Dit is die verskil tussen RPMI en DMEM.
