Sleutelverskil – Gramvlek vs Suurvinnig
Bakterieë is baie klein mikroörganismes. Hulle is deursigtig, en hul opsporing is moeilik onder lewende en onbevlekte toestande. Verskeie kleurmetodes word dus ontwikkel om bakteriese opsporing te vergemaklik. Daar is drie hooftipes kleuringstegnieke: eenvoudige kleuring, differensiële kleuring en strukturele kleuring. Differensiële kleuring is 'n tegniek wat meer as een kleur gebruik om bakterieë te onderskei. Gram vlek en suur-vaste vlek is die mees algemeen bekend as differensiële vlekke. Gram-kleuring is 'n differensiële kleurtegniek wat bakterieë in twee groepe verdeel wat bekend staan as Gram-positiewe bakterieë en Gram-negatiewe bakterieë. Die suurvaste vlek is 'n differensiële vlek wat gebruik word om suurvinnige organismes soos Mycobacterium van nie-suur vinnige organismes te identifiseer. Dit is die sleutelverskil tussen Gram-vlek en Acid Fast-vlek.
Wat is Gram-vlek?
Gram-kleuring is 'n belangrike differensiële kleurtegniek wat gebruik word vir bakteriese identifikasie in mikrobiologie. Hierdie tegniek is in 1884 deur die Deense bakterioloog Hans Christian Gram ingestel. Gram-kleuring kategoriseer bakterieë in twee hoofgroepe genaamd gram positief en gram negatief, wat baie belangrik is in bakteriese klassifikasie en identifikasie. Mikrobioloë voer gram-kleuring uit as 'n eerste stap in bakteriese karakterisering tydens hul studies.
Bakterieë word gegroepeer op grond van die verskille in hul selwand. Gram-positiewe bakterieë bestaan uit 'n dik peptidoglikaanlaag in hul selwand terwyl gram-negatiewe bakterieë saamgestel is uit 'n dun peptidoglikaanlaag in hul selwand. Die uitkoms van die gram-kleuring sal gebaseer wees op die verskil in die dikte van die peptidoglikaanlaag van die selwand.
Grams-kleuring word uitgevoer met behulp van vier verskillende reagense, naamlik; primêre vlek, beitsmiddel, ontkleurmiddel en teenvlek. Kristalviolet en safranien word onderskeidelik as die primêre en teenvlekke gebruik, terwyl gram jodium en 95% alkohol onderskeidelik as die beitsmiddel en ontkleurmiddel gebruik word. Die basiese stappe van gram-vlek is soos volg;
- 'n Bakteriese smeer word op 'n skoon glasskyfie voorberei, deur hitte vasgemaak en afgekoel.
- Smeer is oorstroom met kristalviolet vir 1 – 2 minute.
- Smeer word met stadig lopende kraanwater afgespoel om oortollige vlekke te verwyder.
- Grams jodium word vir 1 minuut op die smeer toegedien.
- Smeer word afgespoel met stadig lopende kraanwater
- Smeer word vir 2 – 5 sekondes met 95% alkohol gewas en met stadig lopende kraanwater afgespoel.
- Smeer is teenbevlek met safranien vir 1 minuut
- Smeer word met stadig lopende kraanwater afgespoel, gedroog en onder die mikroskoop waargeneem.
Aan die einde van die gram-vlek sal gram-negatiewe bakterieë in pienk kleur waargeneem word, terwyl gram-positiewe bakterieë in pers kleur waargeneem sal word.
Figuur 01: Gram-negatiewe en Gram-positiewe bakterieë
Die uitkoms van die gram-vlek word bepaal deur die dikte van die peptidoglikaanlaag in hul selwand. Tydens die ontkleuringstap word primêre vlek en die beitsmiddel maklik van die gram-negatiewe bakterieë verwyder en word dit kleurloos aangesien hulle 'n dun peptidoglikaanlaag het. Die primêre vlek word in die gram-positiewe bakterieë behou, aangesien hulle 'n dik peptidoglikaanlaag het. Die teenvlek sal nie effektief wees vir gram-positiewe bakterieë nie as gevolg van die behoud van die primêre vlek. Dus sal gram-positiewe bakterieë sigbaar wees in primêre vlekkleur, dit wil sê, pers kleur. Die teenvlek sal die gram-negatiewe bakterieë vlek, en hulle sal sigbaar wees in plukkleur, wat die safranienkleur is. Dit is dus maklik om bakterieë in twee groepe volgens gram-kleuring te kategoriseer en dit is waardevol vir bakteriese differensiasie en identifikasie.
Wat is Suurvas?
Suurvastheid is 'n fisiese eienskap van sekere bakterieë, spesifiek hul weerstand teen ontkleuring deur sure tydens kleurprosedures. Sodra hulle gekleur is, weerstaan hierdie organismes verdunde suur- en of etanolgebaseerde ontkleuringsprosedures wat algemeen in baie kleurprotokolle voorkom. Die naam 'suurvas' word dus aan daardie organismes gegee. Hierdie eienskap word getoon as gevolg van 'n hoë vlak van wasagtige materiaal (mikolsure) in hul selwande. Hierdie toets is krities vir die identifikasie van Mycobacterium tuberculosis.
Figuur 2: Suurvinnige Mikobakterieë
Hierdie suur vinnige vlek is ontwikkel deur Paul Ehrlich in 1882. Ehrlich se suur vinnige tegniek is deur Ziehl-Neelsen gewysig en dit word nou meer gereeld gebruik. Suur vinnige kleurprosedure behels drie verskillende reagense. Carbol fuschin word as die primêre vlek gebruik. Suur alkohol word as die ontkleurmiddel gebruik. Metileenblou word as die teenvlek gebruik. Kleurprosedure word soos volg uitgevoer.
- Die primêre vlek (karbolfuchsin) word op die vaste monster op die skyfie toegedien (Alle selle sal in rooi kleur gekleur word).
- Die skyfie word verhit deur vir 5 minute te stoom, wat die vlekke behoorlik in die selle indryf.
- Dan word die ontkleuringsoplossing bygevoeg (Dit verwyder die rooi kleurstof uit alle selle behalwe die suurvinnige bakterieë).
- Methyleenblou word bygevoeg as 'n teenvlek (Dit kleur alle ontkleurde bakteriese selle).
- Suurvinnige bakterieë bly rooi terwyl niesuurvinnige bakterieë in blou vlek.
Wat is die ooreenkomste tussen Gram-vlek en Acid Fast?
- Gram-vlek en Suurvas is twee differensiële kleurtegnieke.
- Albei tegnieke kategoriseer bakterieë in twee groepe.
- Albei tegnieke gebruik twee vlekke en een ontkleur.
Wat is die verskil tussen gramvlek en suurvas?
Gram Stain vs Acid Fast |
|
| Gram-kleuring is 'n differensiële kleurtegniek wat bakterieë in twee groepe Gram-positiewe bakterieë en Gram-negatiewe bakterieë skei. | Acid Fast stain is 'n differensiële vlek wat gebruik word om suurvinnige organismes van niesuurvinnige organismes te identifiseer. |
| Primêre vlek | |
| Kristalviolet is die algemeen gebruikte primêre vlek in gram-kleuring. | Carbol fuchsin is die primêre vlek wat in suurvas gebruik word. |
| Ontkleurmiddel | |
| 95% alkohol word as 'n ontkleurmiddel in gram-vlek gebruik. | Suuralkohol word as 'n ontkleurmiddel in suurvas gebruik. |
| Counter Stain | |
| Gram-vlek gebruik safranien as die teenvlek. | Suurvaste vlek gebruik metileenblou as die teenvlek. |
| Observation | |
| Gram-negatiewe bakterieë word in plukkleur waargeneem en gram-positiewe bakterieë word in pers kleur waargeneem. | Acid Fast-bakterieë word in rooi waargeneem en nie-suurvinnige bakterieë word in blou kleur waargeneem. |
Opsomming – Gramvlek vs Suurvinnig
Visualisering van mikroörganismes in lewende toestand is moeilik. Daarom word biologiese vlekke en kleurprosedures op groot skaal gebruik om hul eienskappe te bestudeer. Differensiële kleuring is een tipe kleurtegniek wat gebruik word om bakterieë te onderskei. Gram vlek en suur vinnige vlek is twee differensiële kleur tegnieke. Gram-kleuring onderskei gram-negatiewe bakterieë en gram-positiewe bakterieë op grond van die dikte van hul selwande. Suurvinnige kleuring onderskei suurvinnige bakterieë van niesuurvinnige bakterieë gebaseer op die mikoliensuurinhoud in die selwand. Dit is die verskil tussen suurvas- en gramvlek.
Laai PDF-weergawe van Gram Stain vs Acid Fast af
Jy kan die PDF-weergawe van hierdie artikel aflaai en dit vir vanlyn doeleindes gebruik soos per aanhalingsnota. Laai asseblief PDF-weergawe hier af. Verskil tussen gramvlek en suurvas.
