Die sleutelverskil tussen BCA- en Bradford-toets is dat BCA-toets tydrowend en minder akkuraat is, terwyl Bradford-toets vinnig en akkuraat is.
BCA en Bradford-toets is twee toetsmetodes vir proteïenkonsentrasiebepaling. Hierdie twee toetse het verskillende beginsels van toetsing en verskille in hul akkuraatheid.
Wat is BCA-toets?
BCA-toets of bisinchoniensuurtoets is 'n biochemiese toets wat nuttig is om die totale konsentrasie proteïen in 'n oplossing te bepaal. Hierdie metode is ook vernoem as Smith-toets na sy uitvinder, Paul K. Smith. Hierdie analitiese metode toon ooreenkomste met Lowry-proteïentoets, Bradford-proteïentoets of biureetreagens. Ons kan die totale proteïenkonsentrasie in 'n gegewe monster waarneem deur 'n kleurverandering van die monsteroplossing, wat van groen na pers gaan. Hierdie kleurverandering vind plaas in verhouding tot die proteïeninhoud. Daarna kan ons 'n kolorimetriese tegniek gebruik om die kleurintensiteit en proteïeninhoud in die monster te ontleed.
BCA-metode van proteïenskatting
Wanneer die meganisme van BCA-toets oorweeg word, bevat die tipiese BCA-oplossing 'n hoogs alkaliese oplossing met 'n pH van byna ongeveer 11.25, en die bestanddele in hierdie oplossing sluit bisinchoniensuur, natriumkarbonaat, natriumbikarbonaat, natriumtartraat en koper(II)sulfaatpentahidraat. Hierdie toets is hoofsaaklik afhanklik van twee chemiese reaksies: die reduksie van koper(II) na koper(I) deur die peptiedbindings in proteïen en chelering van twee molekules bicinchoniensuur met koper(I)-ioon, wat lei tot 'n perskleurige kompleks wat kan absorbeer lig by 562 nm golflengte. In die eerste reaksie is die hoeveelheid koper(II) verminder deur peptiedbindings eweredig aan die hoeveelheid proteïen in die monster.
Wat is Bradford Assay?
Bradford-toets is 'n spektroskopiese analitiese metode wat nuttig is om die konsentrasie proteïen in 'n oplossing te meet. Hierdie metode is in 1976 deur Marion M. Bradford ontwikkel, en dit is 'n betreklik vinnige en akkurate metode.
Kleurreaksie van proteïen en Bradford-reagens
Ons kan hierdie metode gebruik om die konsentrasie van die proteïenhoeveelheid in 'n monster te bepaal. Die chemiese reaksie wat tydens hierdie toets in die monster plaasvind, is uitsluitlik afhanklik van die aminosuursamestelling van die proteïen in die monster.
Bradford-metode van proteïenskatting
Wanneer die metode van hierdie toets oorweeg word, is dit 'n kolorimetriese proteïentoets wat gebaseer is op die absorpsieverskuiwing van die kleurstof genaamd Coomassie Brilliant Blue G-250. Oor die algemeen bestaan hierdie kleurstof in drie vorme as anioniese (blou) vorm, neutrale (groen) vorm en kationiese (rooi) vorm. Daarom, onder suur toestande, verander die kleurstof sy kleur van rooi na blou. Dit is as gevolg van die binding van die proteïen met die kleurstof. Daarenteen, as daar geen proteïen is om met die kleurstof te bind nie, verskyn die kleurverandering nie, die oplossing kry 'n rooi-bruin kleur. Hierdie kleurstof is in staat om 'n sterk, niekovalente kompleks met die karboksielgroep van die proteïen te vorm deur Van der Waal-kragte en elektrostatiese aantrekkings.
Wat is die verskil tussen BCA en Bradford Assay?
BCA en Bradford-toets is twee toetsmetodes vir proteïenkonsentrasiebepaling. Hierdie twee toetse het verskillende beginsels van toetsing en verskille in hul akkuraatheid. Die belangrikste verskil tussen BCA- en Bradford-toets is dat BCA-toets tydrowend en minder akkuraat is, terwyl Bradford-toets vinnig en akkuraat is.
Die volgende infografika som die verskille tussen BCA en Bradford-toets in tabelvorm op.
Opsomming – BCA vs Bradford Assay
BCA-toets of bisinchoniensuurtoets is 'n biochemiese toets wat nuttig is om die totale konsentrasie proteïen in 'n oplossing te bepaal. Bradford-toets is 'n spektroskopiese analitiese metode wat nuttig is om die konsentrasie proteïen in 'n oplossing te meet. Die belangrikste verskil tussen BCA- en Bradford-toets is dat BCA tydrowend en minder akkuraat is, terwyl Bradford-toets vinnig en akkuraat is.
