Die sleutelverskil tussen Bradford- en Lowry-proteïentoets is dat Bradford-proteïentoets gebaseer is op die absorpsieverskuiwing van die kleurstof Coomassie brilliant blue G-250, terwyl Lowry-proteïentoets op die reaksie van koperione (Cu+)-ione gebaseer is geproduseer deur die oksidasie van peptiedbindings met Folin–Cioc alteu reagens.
'n Toetsing is 'n analitiese tegniek wat help om die belangrikste funksionele komponente van 'n monster te karakteriseer. Gevolglik kan 'n toets óf 'n kwalitatiewe óf 'n kwantitatiewe toets wees. Baie velde, insluitend laboratoriumgeneeskunde, farmakologie, omgewingsbiologie, molekulêre biologie, biochemie en immunologie, gebruik gereeld hierdie soort toetse. Bradford- en Lowry-proteïentoets is twee biochemiese toetse wat die proteïenkonsentrasie in 'n monsteroplossing bepaal. Albei toetse gebruik kolorimetriese tegnieke om resultate te verskaf.
Wat is Bradford-proteïentoets?
Bradford-proteïentoets is 'n vinnige spektroskopiese analitiese prosedure vir proteïenanalise. Dit toon hoë akkuraatheid wanneer die proteïenkonsentrasie in 'n oplossing gemeet word. Marion Bradford het hierdie prosedure in 1976 bekendgestel. In hierdie toets is die totale reaksie gebaseer op die aminosuursamestelling van die proteïene wat gemeet is. Met ander woorde, Bradford-proteïentoets is 'n kolorimetriese toets. Dit gebruik die kleurstof Coomassie briljante blou. Gevolglik hang hierdie kolorimetriese proteïentoets af van die absorpsieverskuiwing van die kleurstof. Coomassie briljante blou G-250 bestaan in drie formate: kationies (rooi), anionies (blou) en neutraal (groen). Tydens suur toestande word die rooi vorm van die kleurstof na blou omgeskakel. Dit bevestig die binding van die proteïen. As die proteïen nie teenwoordig is nie, kan die oplossing bruin bly.
Figuur 01: Bradford-proteïentoets
Bradford-proteïentoets verskil van ander proteïentoetse aangesien dit minder vatbaar is vir interferensies van verskeie chemiese verbindings wat in die proteïenoplossing teenwoordig is. Hierdie verbindings sluit in natrium, kalium, glukose en sukrose, ens.
Wat is Lowry-proteïentoets?
Lowry-proteïentoets is 'n biochemiese toets wat gebruik word om die totale vlak van proteïen in 'n oplossing te bepaal. Oliver H. Lowry is die persoon wat hierdie reagens in 1940 ontwikkel het. Die prosedure beeld die totale proteïenkonsentrasie van die oplossing uit deur 'n kleurverandering wat eweredig is aan die proteïenkonsentrasie in die oplossing. Dit is dus ook 'n kolorimetriese proteïentoets.
Die reaksie tussen koperione (Cu+) wat deur die oksidasie van peptiedbindings en Folin-Cioc alteu-reagens geproduseer word, is die basis van hierdie prosedure. Hierdie reagens bevat ook fosfomolibdieensuur en fosfor-wolfraamsuur. Die reaksiemeganisme van Lowry-proteïentoets word egter nie goed verstaan nie. Maar dit behels die oksidasie van sisteïen-, triptofaan- en tirosienreste deur die vermindering van Folin–Cioc alteu-reagens.
Figuur 02: Lowry-proteïentoets
Die sisteïenreste dra by tot die absorpsie wat in Lowry-proteïentoets waargeneem word en die reaksie lei tot 'n briljante blou molekule; heteropoly molibdeen blou. Die reduksie van hierdie molekule word gemeet deur absorbansie by 660nm. Gevolglik lei die konsentrasie van sisteïen- en triptofaanreste wat Folin-Cioc alteu-reagens verminder het die totale konsentrasie van die proteïen in die oplossing af.
Wat is die ooreenkomste tussen Bradford- en Lowry-proteïentoets?
- Bradford- en Lowry-proteïentoetse bepaal die proteïenkonsentrasie in 'n oplossing.
- Albei metodes is kolorimetriese metodes.
- Die sensitiwiteit van beide metodes is ook hoog.
Wat is die verskil tussen Bradford- en Lowry-proteïentoets?
Bradford- en Lowry-proteïentoets is twee tipes toetse wat proteïenkonsentrasie in 'n oplossing bepaal. Bradford-proteïentoets maak staat op die absorpsieverskuiwing van die kleurstof Coomassie brilliant blue G-250 terwyl Lowry-proteïentoets afhang van die reaksie van koperione wat geproduseer word deur die oksidasie van peptiedbindings, met Folin-Cioc alteu-reagens. Dit is dus die belangrikste verskil tussen Bradford- en Lowry-proteïentoets. Bradford-proteïentoets neem 15 minute om 'n resultaat te lewer, terwyl Lowery-proteïentoets 40-60 minute neem om 'n resultaat te lewer. Dit is dus nog 'n verskil tussen Bradford- en Lowry-proteïentoets. Verder is Bradford-proteïentoets afhanklik van die aminosuursamestelling terwyl Lowry-proteïentoets gedeeltelik afhanklik is van die aminosuursamestelling. Dit is dus ook 'n verskil tussen Bradford- en Lowry-proteïentoets.
Below inforaphic verskaf meer besonderhede oor die verskil tussen Bradford- en Lowry-proteïentoets.
Opsomming – Bradford vs Lowry-proteïentoets
'n Toetsing is 'n analitiese tegniek wat gebruik word om die belangrikste funksionele komponent van 'n monster te karakteriseer. Bradford- en Lowry-proteïentoetsing is twee tipes proteïentoetse wat onder kolorimetriese tegnieke funksioneer. Beide Bradford- en Lowry-proteïentoetse bepaal die proteïenkonsentrasie in 'n oplossing. Die belangrikste verskil tussen Bradford en Lowry Protein Assay lê egter in die kolorimetriese tegniek wat hulle gebruik. Bradford-proteïentoets gebruik die Coomassie briljante blou G-250 terwyl Lowry-proteïentoets koperione (Cu+)-ione en Folin-Cioc alteu-reagens gebruik. Verder gee die Bradford-metode vinnige resultate as Lowry-proteïentoets. Beide metodes is egter hoogs sensitiewe metodes en is onderhewig aan steurings van verskeie stowwe.
