Die sleutelverskil tussen DNA- en RNA-probes is dat DNA-probes fragmente van DNA is wat aanvullend tot teikennukleotiedvolgordes is, terwyl RNA-probes stukke enkelstring-RNA is wat komplementêre nukleïensuurvolgorde van teikenvolgordes is.
'n Sonde is 'n kunsmatig gesintetiseerde kort volgorde van DNA of RNA wat radioaktief of met nie-radioaktiewe molekules gemerk kan word. Dit kan 'n lengte van 100 tot 1000 basisse hê. Probes is nuttig om teikennukleotiedvolgordes op te spoor wat komplementêr is tot die volgorde van die sonde. Sodra dit bygevoeg is, word probes gehibridiseer met die komplementêre volgordes of die teikenvolgordes en maak dit sigbaar om die teikenvolgordes te identifiseer aangesien dit radioaktiwiteit dra. Probes is belangrike molekulêre instrumente vir in baie mikrobiese en molekulêre gebiede soos die opsporing van genetiese siektes, in virologie, in forensiese patologie, in vaderskaptoetsing, in DNA-vingerafdrukke, RFLP, molekulêre sitogenetika, in situ hibridisasie, ens.
Wat is DNA-probes?
DNA-probes is enkelstrengige stukke DNA. Hulle kan gebruik word om die teenwoordigheid van komplementêre nukleïensuurvolgordes (teikenvolgordes) deur hibridisasie op te spoor. Sodra 'n DNS-probe met sy komplementêre volgorde gehibridiseer het, vorm dit 'n dubbelstring baster. Om hulle op te spoor, word DNS-probes gewoonlik gemerk met radio-isotope, biotien, epitope of fluorofore. Die DNA-probes wat met biotien gemerk is, kan met streptavidien-gemerkte alkaliese fosfatase deur 'n aantal ensiematiese en chemiese metodes opgespoor word.
Figuur 01: DNA-ondersoek
Die nukleotiedvolgorde van die DNA-probe is bekend. Hulle is kort rye met 'n lengte van 100 tot 1000 basispare. Lang DNA-probes kan deur rekombinante DNA-tegnologie gegenereer word. Hulle kan ook gegenereer word deur PCR en kloning. In kliniese mikrobiologie laboratoriums is DNS-probes geredelik beskikbaar vir die vinnige diagnose van aansteeklike siektes.
Wat is RNA-probes?
RNA-probes is enkelstrengige stukke RNA. Hulle is komplementêre reekse tot teikenreekse in die monster. Hulle word gewoonlik gesintetiseer met die RNA-polimerases van bakteriofage SP6, T7 of T3 deur in vitro transkripsie van DNA. Lang RNA probes kan gegenereer word deur in vitro transkripsie vanaf gelineariseerde plasmied DNA. Oor die algemeen bind RNA-probes sterk en stywer aan hul komplementêre volgordes as DNA-probes. Soortgelyk aan DNA-probes, kan RNA-probes ook gemerk word terwyl hulle getranskribeer word.
Wat is die ooreenkomste tussen DNA- en RNA-probes?
- Beide DNA- en RNA-probes is enkelstring-nukleotiedvolgordes.
- Albei is kunsmatig ontwerp en gesintetiseer.
- Boonop kan hulle gemerk word met radio-isotope, epitope, biotien of fluorofore.
- Hulle het 'n sterk affiniteit met 'n spesifieke DNA- of RNA-teikenvolgorde.
- Hulle word gebruik in verskeie klad- en in situ hibridisasietegnieke vir die opsporing van teikennukleïensuurvolgordes.
- Albei tipes probes kan met hul komplementêre rye gehibridiseer word.
- Hulle word ook gebruik in die identifikasie van mikroörganismes en die diagnose van aansteeklike, oorgeërfde en ander siektes.
Wat is die verskil tussen DNA- en RNA-probes?
DNA-sonde is 'n kort stuk DNA wat aanvullend tot die teikenvolgorde is. Aan die ander kant is die RNA-sonde 'n kort enkelstrengige stuk RNA wat aanvullend tot die teikenvolgorde is. Dit is dus die sleutelverskil tussen DNA- en RNA-probes. Verder bevat DNA-probes A, T, C en G terwyl RNA-probes A, U, C en G bevat.
Boonop is 'n verdere verskil tussen DNA- en RNA-probes hul termodinamiese stabiliteit. RNA-probes toon groter termodinamiese stabiliteit in vergelyking met DNA-probes.
Infografiese tabelle onder die belangrike verskille tussen DNA- en RNA-probes.
Opsomming – DNA vs RNA Probes
'n Sonde is 'n klein fragment van DNA of RNA wat gebruik word om die teenwoordigheid van 'n spesifieke volgorde in die monster van DNA of RNA deur molekulêre hibridisasie op te spoor. DNA-probes is kort enkelstrengige DNA-fragmente terwyl RNA-probes kort enkelstrengige RNA-volgordes is. Hulle is bekende rye. Termodinamiese stabiliteit is groter in RNA-probes as DNA-probes. RNA-probes bind styf aan hul komplementêre volgordes as wat DNA-probes bind. Dus, dit som die verskil tussen DNA- en RNA-probes op.
