Die sleutelverskil tussen agarose- en poliakrielamiedgelelektroforese is dat agarosegelelektroforese horisontaal gegote agarosegels gebruik om betreklik groter fragmente van DNA te skei, terwyl poliakrielamiedgelelektroforese vertikaal gegote poliakrielamiedgels gebruik om korter nukleïensuurfragmente te skei.
Elektroforese is 'n tipe tegniek wat 'n elektriese veld gebruik wat oor 'n jelmatriks toegepas word om biomolekules soos DNA, RNA en proteïene te skei. Hierdie skeiding van biomolekules soos DNA, RNA en proteïene deur elektroforese is gebaseer op lading en grootte. Monsters word in die putte van die jel gelaai. Later word die elektriese veld oor die jel toegepas. Die veld veroorsaak dat negatief-gelaaide molekules na die positiewe elektrode beweeg. Die jelmatriks dien as 'n molekulêre sif waardeur die kleinste molekules vinnig beweeg of beweeg terwyl groter molekules stadig beweeg. Dit maak die skeiding van molekules moontlik op grond van lading en grootte. Daarom is agarose- en poliakrielamiedgelelektroforese twee tipes gelelektroforesetegnieke wat hoofsaaklik help om molekules te skei op grond van hul grootte en lading.
Wat is Agarose Gel Elektroforese?
Agarosegelelektroforese is 'n tegniek wat agarosegels gebruik om biomolekules soos DNA en RNA uit te skei. Dit is 'n tegniek wat gebruik word om nukleïensure hoofsaaklik volgens grootte te skei. Die hoofverbinding genaamd agarose wat in hierdie tegniek gebruik word, is 'n polisakkaried. Dit kom van seewier. Agarose kan in kokende buffer opgelos word en dan in 'n skinkbord gegooi word wat horisontaal gehou word. In die skinkbord word dit gestol wanneer dit afkoel om 'n plaat te vorm. Agarose-gels word met 'n kam in plek gegooi om putte te maak waarin nukleïensure soos DNA of RNA gelaai word sodra die jel gestol het.
Figuur 01: Agarose Gel Elektroforese
Die gel word later in 'n toepaslike buffer gedompel, en 'n stroom word oor die gel toegedien. DNA het 'n eenvormige negatiewe lading wat onafhanklik is van die volgordesamestelling van die molekule. Daarom sal DNS-molekules van die katode (-) na die anode (+) migreer. Die migrasietempo is direk afhanklik van die grootte van die molekule. Die grootste makromolekules het die moeilikste tyd om deur die jel te navigeer. Aan die ander kant glip die kleiner makromolekules vinnig en redelik maklik deur die jel.
Wat is Polyacrylamide Gel Elektroforese?
Polyacrylamide gel elektroforese (PAGE) is 'n tegniek wat poliakrielamied gels gebruik om biomolekules uit te skei. Dit is 'n tegniek wat wyd gebruik word om biologiese makromolekules, gewoonlik proteïene en nukleïensure, te skei volgens hul elektroforetiese mobiliteit. Die hidrasie van akrilonitriel lei tot die vorming van akrielamiedmolekules deur nitrilhidrase. Akrilamied is oplosbaar in water, en met die byvoeging van vryradikaal-inisieerders polimeriseer akrilamied, wat lei tot die vorming van poliakrielamiedgel. Normaalweg lei verhoogde konsentrasies akrielamied tot verminderde porieëgrootte in die jel. Poliakrielamiedgels word vertikaal gegiet, anders as agarosegels.
Figuur 02: Poliakrielamiedgelelektroforese
In poliakrielamiedgelelektroforese kan die molekules in hul oorspronklike toestand loop, wat die hoër-orde struktuur van molekules behou. Hierdie metode word native PAGE genoem. Alternatiewelik kan 'n chemiese denaturant ook bygevoeg word om die hoër-orde struktuur te verwyder en die molekule in 'n ongestruktureerde molekule te verander wie se mobiliteit slegs van sy lengte afhang. Hierdie tipe word SDS-PAGE genoem.
Wat is die ooreenkomste tussen agarose en poliakrielamiedgelelektroforese?
- Agarose- en poliakrielamiedgelelektroforese is twee tipes gelelektroforesetegnieke.
- In werklikheid is dit molekulêre biologiese tegnieke.
- Albei tegnieke word gebruik om biologiese makromolekules soos DNA en proteïene op te spoor.
- Hierdie tegnieke word deur bekwame tegnici of navorsers gedoen.
- In beide tegnieke is die skeiding van makromolekules gebaseer op die lading en die grootte.
- Albei tegnieke laat die skeiding van nukleïensure soos DNA en RNA toe.
Wat is die verskil tussen agarose en poliakrielamiedgelelektroforese?
Agarosegelelektroforese is 'n tegniek wat horisontaal gegiete agarosegels gebruik om biomolekules uit te skei, terwyl poliakrielamiedgelelektroforese 'n tegniek is wat vertikaal gegiete poliakrielamiedgels gebruik om biomolekules uit te skei. Dit is die belangrikste verskil tussen agarose- en poliakrielamiedgelelektroforese. Verder word agarosegelelektroforese gebruik vir die skeiding van DNA en RNA, terwyl poliakrielamiedgelelektroforese gebruik word vir die skeiding van nukleïensure soos DNA, RNA of proteïene.
Die volgende tabel som die verskil tussen agarose- en poliakrielamiedgelelektroforese op.
Opsomming – Agarose vs Polyacrylamide Gel Elektroforese
Agarose- en poliakrielamied-gelelektroforese is twee tipes gelelektroforesetegnieke wat in molekulêre biologie-laboratoriums gebruik word. Agarosegelelektroforese gebruik 'n agarosegel om biomolekules uit te skei. Agarose is oor die algemeen nie giftig vir mense nie, terwyl poliakrielamied giftig is vir mense. Boonop toon agarosegelelektroforese 'n lae resolusie terwyl poliakrielamiedgelelektroforese 'n meer resolusie toon. Poliakrielamiedgelelektroforese gebruik 'n poliakrielamiedgel om biomolekules uit te skei. Dit som die verskil op tussen agarose- en poliakrielamiedgelelektroforese
