Die sleutelverskil tussen DNA- en RNA-isolasie is dat DNA-isolasie 'n prosedure is waar 'n tipe nukleïensuur genaamd DNA uit 'n biologiese sel onttrek word, terwyl RNA-isolasie 'n prosedure is waar 'n tipe nukleïensuur genaamd RNA uit 'n biologiese sel onttrek.
Nukleinsuur-isolasie is die beginpunt in 'n groot verskeidenheid stroomaf toepassings. Die hoë kwaliteit van nukleïensure in die beginmonsters is 'n sleutelfaktor vir die sukses van daaropvolgende stroomaf toedienings. Nukleïensuurisolasie kan gedefinieer word as 'n reeks stappe om nukleïensuur in 'n suiwerheidsmonster te verkry wat vir verskillende stroomaf toedieningstappe gebruik kan word. Die doel van nukleïensuurekstraksie is om die selmembraan te disintegreer en die maksimum eliminasie van lipiede en proteïene te bereik om suiwer nukleïensure soos DNA of RNA te verkry.
Wat is DNA-isolasie?
DNA-isolasie is 'n roetineprosedure waar 'n tipe nukleïensuur genaamd DNA uit 'n biologiese sel onttrek word. DNS-isolasie word uitgevoer deur DNS uit bloed, bevrore weefselmonsters en paraffienweefselblokke te onttrek. Daar is drie hoofstappe in DNA-isolasie, insluitend sellise, onttrekking van DNA en presipitasie. In sellise word die selle in 'n monster van mekaar geskei, dikwels deur fisiese middele soos maal of vortexing en in 'n oplossing wat sout bevat gesit. Gewoonlik help die positief gelaaide natriumione in die sout om die negatief gelaaide fosfaatgroepe wat langs die ruggraat van die DNS loop, te beskerm. Later word 'n skoonmaakmiddel bygevoeg om die lipiede in die selmembraan en kerne af te breek, wat DNS vrystel soos hierdie membrane ontwrig word.
Figuur 01: DNA-isolasie
DNA-ekstraksie word uitgevoer om 'n skoon monster van DNA te kry. Dikwels word 'n protease-ensiem bygevoeg om DNA-geassosieerde proteïene en ander sellulêre proteïene af te breek. Boonop kan sommige van die sellulêre puin verwyder word deur die monster te filter. Laastens word die DNS presipiteer deur alkohol te gebruik. Verder, as daar baie DNA is, kan 'n suinige wit neerslag aan die einde van die prosedure waargeneem word.
Wat is RNA-isolasie?
RNA-isolasie is 'n prosedure waar 'n tipe nukleïensuur genaamd RNA uit 'n biologiese sel onttrek word. Hierdie prosedure word dikwels bemoeilik deur die teenwoordigheid van ribonuklease-ensieme in selle en weefsels wat RNA afbreek. Verskeie metodes word in molekulêre biologie gebruik om RNA uit monsters te isoleer, soos guanidinium-tiosianaat-fenol-chloroform-ekstraksie.
Figuur 02: RNA-isolasie
RNA-isolasie bestaan gewoonlik uit verskeie stappe, insluitend sellise en homogenisering, blus van biochemiese prosesse, nukleïensuurverdeling, RNA-herwinning, ru-suiwering en die beoordeling van die kwaliteit van RNA. Die filtreerpapiergebaseerde lise- en elueringsmetode het 'n hoë deurvloeikapasiteit in RNA-ekstraksie. Verder is RNA-ekstraksie in vloeibare stikstof deur gebruik te maak van 'n vysel en stamper ook 'n baie nuttige metode aangesien dit ribonuklease-aktiwiteit voorkom.
Wat is die ooreenkomste tussen DNA- en RNA-isolasie?
- DNA- en RNA-isolasie is twee tipes nukleïensuur-isolasieprosedures.
- Albei prosedures het soortgelyke basiese stappe, soos sellise, onttrekking en suiwering.
- Hierdie prosedures isoleer belangrike nukleïensuurtipes wat 'n aantal stroomaf-toepassings het.
- Hulle word in laboratoriumopstellings uitgevoer.
- Hulle kan uitgevoer word met behulp van vervaardigde stelle.
Wat is die verskil tussen DNA- en RNA-isolasie?
In DNA-isolasie word 'n tipe nukleïensuur genaamd DNA uit 'n biologiese sel onttrek, terwyl in RNA-isolasie 'n tipe nukleïensuur genaamd RNA uit 'n biologiese sel onttrek word. Dit is dus die sleutelverskil tussen DNA- en RNA-isolasie. Verder word die DNA-isolasie normaalweg by ongeveer pH 7 tot 8 uitgevoer, terwyl RNA-isolasie normaalweg by ongeveer pH 4.5 uitgevoer word.
Die onderstaande infografika bied die verskille tussen DNA- en RNA-isolasie in tabelvorm aan vir vergelyking langs mekaar.
Opsomming – DNA vs RNA-isolasie
DNA- en RNA-isolasie is twee tipes nukleïensuur-isolasieprosedures. DNS-isolasie is 'n prosedure waartydens DNS uit 'n biologiese sel onttrek word. RNA-isolasie is 'n prosedure waartydens RNA uit 'n biologiese sel onttrek word. Dit is dus die sleutelverskil tussen DNA- en RNA-isolasie.