Die sleutelverskil tussen omgekeerde fase en normale fase HPLC is dat die omgekeerde fase HPLC 'n niepolêre stilstaande fase en 'n polêre mobiele fase gebruik terwyl die normale fase HPLC 'n polêre stilstaande fase en 'n minder polêre mobiele fase gebruik.
Die normale fase HPLC is die oudste tegniek van HPLC wat Tswett in sy skeidings van plantekstrakte gebruik het; hy het kryt in 'n glaskolom gebruik. Dit was die klassieke modus van chromatografie wat daartoe gelei het dat dit as die "normale" tegniek genoem is. Omgekeerde-fase HPLC, aan die ander kant, is die teenoorgestelde van die normale tegniek, wat wetenskaplikes onlangs ontwikkel het.
Wat is omgekeerde fase HPLC?
Omgekeerde fase HPLC is 'n chromatografiese tegniek waarin ons 'n hidrofobiese stilstaande fase gebruik. Onder alle HPLC-metodes gebruik ons hierdie metode vir ongeveer 70% vanweë die wye toepaslikheid en reproduseerbaarheid daarvan. Die stilstaande fase is nie-polêr en die mobiele fase is polêr.
Meeste van die tye gebruik wetenskaplikes 'n waterige mengsel van water met 'n mengbare, polêre organiese oplosmiddel, soos asetonitriel of metanol as die mobiele fase. Daarom is die analiete in wisselwerking met die nie-polêre stilstaande fase.
Wat is normale fase HPLC?
Normale fase HPLC is 'n chromatografiese tegniek waarin ons 'n hidrofiele stilstaande fase gebruik. Dit is die tradisionele metode van HPLC, alhoewel ons dit nie so baie gebruik nie. Die stilstaande fase is polêr, en die mobiele fase is nie-polêr. Belangriker nog, die mobiele fase van hierdie tegniek is 100% organies. Dit beteken dat geen water hiervoor gebruik word nie.
Figuur 01: 'n Monsterprofiel vir normale fase en omgekeerde fase HPLC chromatogramme volgens die polariteit van komponente in die analiet.
Tipies bevat die stilstaande fase silika, siano, diol, aminogebind fases, ens. Mobiele fases sluit organiese oplosmiddels soos heksaan, etielasetaat, ens. in. Hierdie tegniek is gebaseer op die behoud van oplosmiddel- of analietmolekules op polêre stilstaande fase.
Wat is die verskil tussen omgekeerde fase en normale fase HPLC?
Omgekeerde fase HPLC is 'n chromatografiese tegniek waarin ons 'n hidrofobiese stilstaande fase gebruik. Die stilstaande fase van hierdie tegniek is nie-polêr terwyl die mobiele fase polêr is. Verder gebruik wetenskaplikes 'n waterige mengsel van water met 'n mengbare, polêre organiese oplosmiddel, soos asetonitril of metanol as die mobiele fase in omgekeerde fase HPLC. Daarteenoor is die normale fase HPLC 'n chromatografiese tegniek waarin ons 'n hidrofiele stilstaande fase gebruik. Die stilstaande fase van hierdie tegniek is polêr terwyl die mobiele fase nie-polêr is. Benewens dit, gebruik wetenskaplikes organiese oplosmiddels soos heksaan, etielasetaat, ens. as die mobiele fase van normale fase HPLC. Die onderstaande infografika bied die verskil tussen omgekeerde fase en normale fase HPLC in 'n tabelvorm aan.
Opsomming – Omgekeerde fase vs normale fase HPLC
Omgekeerde fase en normale fase HPLC tegnieke is twee vloeistofchromatografiese tegnieke. Die sleutelverskil tussen omgekeerde fase en normale fase HPLC is dat die omgekeerde fase HPLC 'n niepolêre stilstaande fase en 'n polêre mobiele fase gebruik, terwyl die normale fase HPLC 'n polêre stilstaande fase en 'n minder polêre mobiele fase gebruik.
