Die sleutelverskil tussen HPLC en vinnige HPLC is dat die pompdruk wat ons vir HPLC gebruik ongeveer 40 MPa is, terwyl die pompdruk vir vinnige HPLC ongeveer 3-5 MPa is.
Die mees algemene tegniek wat ons gebruik om komponente van 'n mengsel te skei, is “vloeistofchromatografie”. Daar is verskeie tegnieke om hierdie doel te bereik waaruit HPLC baie gewild is. HPLC staan vir High Performance Liquid Chromatography wat komponente van 'n vloeistofmengsel op 'n vinnige en doeltreffende manier identifiseer, kwantifiseer en skei. Vinnige HPLC is 'n spesiale toepassing van HPLC wat onlangs die aandag getrek het van diegene wat betrokke is by die studie van oplossings.
Wat is HPLC?
HPLC is hoë werkverrigting vloeistofchromatografie. Dit maak gebruik van 'n hoë druk om oplosmiddels te stoot sodat dit deur 'n kolom beweeg. Dit is ook 'n ideale manier om verskeie verbindings soos aminosure, nukleïensure, koolhidrate, steroïede, antibiotika en koolwaterstowwe te skei en te bestudeer. HPLC het baie voordele bo ander metodes van skeiding van mengsels soos hoër resolusie en vinniger analise. Dit vernietig die behoefte aan herverpakking en regenerasie en bied beter beheer oor parameters en verhoog dus die doeltreffendheid van skeiding. Ideaal gesproke is HPLC geskik vir grootskaalse toepassings aangesien dit baie klein deeltjies kan skei en die gebruik van hoë drukke toelaat wat dit maklik maak vir oplosmiddels om maklik te vloei.
Figuur 01: HPLC-kolom
In kort, die metode van werking van die HPLC-tegniek is soos volg. Eerstens moet ons die monster in die stroom van mobiele fase in diskrete klein hoeveelhede inbring met behulp van 'n pomp. Die pompdruk moet op 40 MPa gehandhaaf word. Hierdie stroom van mobiele fase perkoleer deur die kolom van HPLC. Dan gaan die komponente in die monster ook deur die kolom. Hul spoed van beweging verskil egter van mekaar as gevolg van die verskil in die interaksies tussen die monsterkomponente en die adsorbens binne die kolom. Ons noem hierdie adsorbent as die stilstaande fase omdat dit binne die kolom woon (nie beweeg nie). Dan, aan die einde van die kolom, kan ons die monster wat uit die kolom elueer versamel, en daardeur kan ons die komponente in die monster afsonderlik versamel.
Wat is Fast HPLC?
Onlangs het navorsingswetenskaplikes by die Schering Plough-navorsingsinstituut 'n vinnige HPLC-tegniek ontwikkel wat 'n gevorderde weergawe van HPLC is, aangesien dit selfs vinniger skeiding van verbindings uit 'n mengsel moontlik maak. Ook bekend as vinnige HPLC, maak hierdie tegniek gebruik van 'n 2.7um saamgesmelte kern silika deeltjies wat gemaak word deur 0.5um poreuse silika oor 'n soliede silika deeltjie te smelt. Hierdie uniek vervaardigde deeltjies maak die skeidingsprosedure baie vinnig en dit ook by lae terugdruk as wat ons in HPLC gebruik.
Figuur 02: FPLC-apparaat
Fast HPLC kry resultate wat vergelykbaar is met UPLC, maar wetenskaplikes meen dat hierdie tegniek voortreflik is aangesien dit nie baie duur ultrahoëdruktoerusting benodig nie. Wat wonderlik is, is dat vinnige HPLC geen nuwe laboratoriumprotokolle benodig nie.
Wat is die verskil tussen HPLC en Fast HPLC?
HPLC is hoë werkverrigting vloeistofchromatografie en vinnige HPLC is 'n gevorderde vorm van hoë werkverrigting vloeistofchromatografie. Die belangrikste verskil tussen HPLC en vinnige HPLC is dat die pompdruk wat ons vir HPLC gebruik ongeveer 40 MPa is. Terwyl die pompdruk vir vinnige HPLC ongeveer 3-5 MPa is. Verder kan ons verskillende verbindings soos aminosure, nukleïensure, koolhidrate, steroïede, antibiotika en koolwaterstowwe skei deur die HPLC-tegniek te gebruik terwyl die vinnige HPLC-tegniek hoofsaaklik gebruik word vir die skeiding van proteïene.
Die infografika hieronder bied meer inligting oor die verskil tussen HPLC en vinnige HPLC.
Opsomming – HPLC vs Fast HPLC
HPLC is 'n tegniek van vloeistofchromatografie wat oor die hele wêreld baie gewild geword het. Fast HPLC is 'n nuwe weergawe van HPLC, navorsingswetenskaplikes by Schering Plough Institute het hierdie nuwe tegniek ontwikkel. Die belangrikste verskil tussen HPLC en vinnige HPLC lê op die pompdruk wat ons vir die skeiding gebruik. Dit is; die pompdruk wat ons vir HPLC gebruik is ongeveer 40 MPa. Maar die pompdruk vir vinnige HPLC is ongeveer 3-5 MPa.
