Die sleutelverskil tussen direkte en indirekte immunofluoressensie is dat die direkte immunofluoressensie 'n enkele teenliggaam gebruik wat teen die teiken van belang werk terwyl die indirekte immunofluoressensie twee teenliggaampies gebruik om die teiken van belang te benoem.
Immunofluoressensie of selbeelding is 'n tegniek wat gebruik word om 'n spesifieke teikenantigeen met 'n fluorofoor te merk. Hier is die fluorofoor 'n fluoresserende chemiese verbinding wat weer lig kan uitstraal by ligopwekking. Wanneer 'n fluorofoor met die teikenantigeen bind, laat dit die opsporing van die teikenmolekule in die monster toe. Om dit verder te beskryf, wanneer 'n antigeen met 'n spesifieke teenliggaam bind, kan dit met fluorofore gekonjugeer word. Gevolglik is dit maklik om die teenwoordigheid van die teikenantigeen in die monster op te spoor wanneer dit onder die fluoressensiemikroskoop waargeneem word.
Daar is boonop twee tipes immunofluoressensie; direkte en indirekte immunofluoressensie. Die verskil tussen direkte en indirekte immunofluoressensie lê hoofsaaklik in die aantal teenliggaampies wat gebruik word en die fluorofoor-konjugasie. Dit wil sê, in direkte immunofluoressensie konjugeer die fluorofoor direk aan die primêre teenliggaam terwyl in indirekte immunofluoressensie die fluorofoor met die sekondêre teenliggaam verbind.
Wat is direkte immunofluoressensie?
Immunofluoressensie gebruik teenliggaampies om spesifieke teikenantigene op te spoor. Direkte immunofluoressensie is een van die twee tipes immunofluoressensie. In direkte immunofluoressensie behels 'n enkele teenliggaam (primêre teenliggaam) en die fluorofoor verbind direk met die primêre teenliggaam. Wanneer die teenliggaam met die teikenantigeen gebind word, gee fluorofoor fluoressensie uit wat deur 'n fluoressensiemikroskoop opgespoor kan word.
Figuur 01: Direkte Immunofluoressensie
Direkte immunofluoressensie is egter 'n duur metode aangesien die primêre gekonjugeerde teenliggaampies duur is in vergelyking met die sekondêre teenliggaampies. Nietemin behels dit nie 'n bykomende stap nie, dus 'n korter tegniek. Verder word nie-spesifieke bindings verminder in direkte immunofluoressensie. Gevolglik is spesie-kruisreaktiwiteit laag. Maar in opsporing is die sensitiwiteit van die direkte immunofluoressensie swak in vergelyking met die indirekte immunofluoressensie.
Wat is indirekte immunofluoressensie?
Indirekte immunofluoressensie is die tweede tipe immunofluoressensie wat twee tipes teenliggaampies soos primêre en sekondêre teenliggaampies in die etikettering van die teikenantigeen behels. In hierdie metode konjugeer die fluorofoor met die sekondêre teenliggaam. Gevolglik behels hierdie tegniek 'n bykomende stap.
Figuur 02: Immunofluoressensie
Die sensitiwiteit is egter hoog in hierdie metode aangesien verskeie fluorofore aan sekondêre teenliggaampies gekonjugeer kan word en dit maak die opsporing makliker. Verder is indirekte immunofluoressensie goedkoper as gevolg van die feit dat die konjugasie van sekondêre teenliggaampies goedkoper en makliker is. In vergelyking met die direkte immunofluoressensie, is spesie-kruisreaktiwiteit hoog in die indirekte metode.
Wat is die ooreenkomste tussen direkte en indirekte immunofluoressensie?
- Hulle is twee tipes immunofluoressensie tegnieke.
- Primêre teenliggaampies en fluorofoor is betrokke by albei metodes.
- Die antigeen-teenliggaamreaksie vind ook in beide metodes plaas.
- Verder gebruik beide direkte en indirekte immunofluoressensie 'n fluoressensiemikroskoop vir die opsporing van antigeen.
Wat is die verskil tussen direkte en indirekte immunofluoressensie?
Immunofluoressensie kan direk of indirek wees, gebaseer op die fluorofoor-konjugasie met die teenliggaampies wat gebruik word. In direkte immunofluoressensie konjugeer die fluorofoor met die primêre teenliggaam, wat die enkele teenliggaam is wat by hierdie tegniek betrokke is. In teenstelling hiermee, in indirekte immunofluoressensie, konjugeer die fluorofoor met die sekondêre teenliggaam, wat een van die twee tipes teenliggaampies is wat by die tegniek betrokke is. Die belangrikste verskil tussen direkte en indirekte immunofluoressensie is dus die tipe teenliggaampie wat met die fluorofoor verbind.
Die volgende infografika verskaf 'n sy-aan-sy-vergelyking van die verskil tussen direkte en indirekte immunofluoressensie.
Opsomming – Direkte vs Indirekte Immunofluoressensie
Immunofluoressensie is 'n tegniek wat gebruik word om die teenwoordigheid van spesifieke antigene in 'n monster op te spoor. Hierdie tegniek gebruik spesifieke teenliggaampies. Daarom konjugeer die teenliggaampies met fluorofore om hulle op te spoor met behulp van 'n fluoresserende mikroskoop. Boonop is daar twee tipes immunofluoressensie, naamlik direkte en indirekte immunofluoressensie. Direkte immunofluoressensie behels 'n enkele teenliggaam en fluorofoor wat direk aan hierdie teenliggaam gekonjugeer is. Indirekte immunofluoressensie behels twee teenliggaampies; primêre en sekondêre en fluorofoor gekonjugeer aan die sekondêre teenliggaam. Aangesien verskeie sekondêre teenliggaampies met 'n primêre teenliggaam kan bind en verskeie fluorofore met sekondêre teenliggaampies kan konjugeer, is indirekte immunofluoressensie 'n meer sensitiewe metode as die direkte metode. Verder is die indirekte metode goedkoper as die direkte metode. Dit is dus die verskil tussen direkte en indirekte immunofluoressensie.
