Die sleutelverskil tussen RIA en ELISA is dat radio-immunotoets (RIA) 'n immunotoetstegniek is wat radioisotope gebruik om antigeen-teenliggaamkomplekse op te spoor, terwyl ensiemgekoppelde immunosorbenttoets (ELISA) 'n immunotoetstegniek is wat ensieme gebruik om antigeen op te spoor -teenliggaamkomplekse.
Opsporing van spesifieke proteïene soos antigene is uiters belangrik in siektediagnose. Daarom is RIA en ELISA twee immunotoetstegnieke wat in laboratoriums gebruik word om spesifieke proteïene vinnig op te spoor, veral antigene. Oor die algemeen bind 'n spesifieke teenliggaam aan die teikenantigeen en vorm 'n sigbare kompleks bekend as presipitien. Hierdie teenliggaampies en antigeenkomplekse kan deur verskillende tegnieke geïdentifiseer word. Die tegniek om die antigeen-teenliggaamkompleks op te spoor deur radio-isotope te gebruik staan bekend as RIA, en die tegniek om die antigeen-teenliggaamkompleks op te spoor deur ensieme te gebruik staan bekend as ELISA.
Wat is RIA?
Radio-immuuntoets (RIA) is 'n immunotoetstegniek wat antigeen- en teenliggaamkomplekse met behulp van radio-isotope opspoor. Rosalyn Sussman Yalow het hierdie tegniek in 1960 met die hulp van Solomon Berson ontwikkel. Vir hierdie merkwaardige ontdekking het Rosalyn Sussman Yalow die Nobelprys vir medisyne in 1977 gewen. Tipies word 'n bekende hoeveelheid van 'n antigeen vir die eerste keer radioaktief in radio-immunotoetsing. Hierdie tegniek gebruik gereeld gamma-radioaktiewe isotope van jodium, genaamd 125-I, om te etiketteer antigene. Hierdie radio-isotope heg gewoonlik aan die tyrosienaminosuur van die antigeen. Dan word die radio-gemerkte antigeen met teenliggaampies gemeng. As gevolg hiervan bind die radio-gemerkte antigeen en teenliggaam spesifiek aan mekaar.
Later word 'n monster van serum wat 'n onbekende hoeveelheid van dieselfde antigeen bevat, bygevoeg. Dit veroorsaak dat die ongemerkte antigeen van die serum kompeteer met die radio-gemerkte antigeen vir teenliggaambindingsplekke. Soos die konsentrasie van ongemerkte antigeen toeneem, bind meer daarvan aan die teenliggaam, wat die radio-gemerkte variant verplaas. Dit verminder dus die verhouding van teenliggaamgebonde radio-gemerkte antigeen tot vry radio-gemerkte antigeen. Aan die einde van die prosedure word die gebonde antigene uitgeskei. Uiteindelik word die radioaktiwiteit van vrye antigene in die oorblywende supernatant met 'n gamma-teller gemeet.
Wat is ELISA?
ELISA is 'n immunotoetstegniek wat antigeen- en teenliggaamkomplekse opspoor deur ensieme te gebruik. Dit is 'n biochemiese analitiese toets wat die eerste keer in 1971 deur Engvall en Perlmann beskryf is. In die meeste eenvoudige vorme van ELISA-tegnieke word antigene van die pasiëntmonster aan 'n soliede oppervlak geheg. Dan word 'n bypassende teenliggaam oor die oppervlak toegedien, sodat dit aan die antigeen kan bind.
Figuur 01: ELISA
Hierdie spesifieke teenliggaam is aan 'n ensiem gekoppel. Later word enige ongebonde teenliggaampies verwyder deur met skoonmaakmiddel te was. In die laaste stap van hierdie tegniek word die ensiem se substraat bygevoeg. As daar 'n behoorlike binding van antigeen en teenliggaampies is, produseer die daaropvolgende reaksie 'n waarneembare kleursein, meestal 'n kleurverandering.
Wat is die ooreenkomste tussen RIA en ELISA?
- RIA en ELISA is immunotoetstegnieke.
- Albei tegnieke beskik oor antigeen- en teenliggaamkompleksvorming.
- Hierdie tegnieke kan gebruik word om onbekende proteïene in monsters op te spoor.
- Hulle word albei gebruik vir die diagnose van siektes in laboratoriums.
- Albei is hoogs spesifieke en sensitiewe tegnieke.
Wat is die verskil tussen RIA en ELISA?
RIA is 'n immunotoetstegniek vir die opsporing van die antigeen-teenliggaamkompleks deur radio-isotope te gebruik. ELISA is 'n immunotoetstegniek vir die opsporing van die antigeen-teenliggaamkompleks deur ensieme te gebruik. Dit is dus die belangrikste verskil tussen RIA en ELISA. Boonop word die antigeen in die RIA-tegniek gemerk, maar in ELISA word die teenliggaam gemerk. Verder, in die RIA-tegniek, is etiketteringmolekules radio-isotope, terwyl, in ELISA, etiketteringmolekules ensieme is. Dit is dus nog 'n verskil tussen RIA en ELISA.
Die onderstaande infografika toon meer verskille tussen RIA en ELISA in tabelvorm.
Opsomming – RIA vs ELISA
Immunotoetse speel 'n baie belangrike rol in verskeie bioanalitiese instellings, soos kliniese diagnostiek, biofarmaseutiese analise, omgewingsmonitering, biosekuriteit en voedseltoetsing. Sedert die 1960's is 'n wye reeks immunotoetse ontwikkel. RIA en ELISA is beide immunoassay tegnieke. RIA is 'n immunoassay-tegniek vir die opsporing van antigeen-teenliggaamkompleks deur radio-isotope te gebruik. ELISA is 'n immunotoetstegniek om antigeen-teenliggaampies op te spoor deur ensieme te gebruik. Dit is dus die opsomming van die verskil tussen RIA en ELISA.
