Die sleutelverskil tussen Elisa en Elispot is dat Elisa 'n ensiemgekoppelde immunosorbenttoets is wat die totale konsentrasie van afgeskeide seinproteïene bepaal, terwyl Elispot 'n ensiemgekoppelde immunosorbenttoets is wat individuele sitokienafskeiende selle opspoor.
Elisa en Elispot is twee ensiem-gekoppelde immunosorberende toetse wat wyd gebruik word in medisyne, plantpatologie, biotegnologie en verskillende farmaseutiese industrieë. In hierdie tegnieke word 'n proteïenanaliet opgespoor deur 'n teenliggaam wat daarteen gerig is. Elisa is die gewildste ensiem-gekoppelde immunosorbent-toets wat in laboratoriums gebruik word. Aan die ander kant is Elispot 'n ensiem-gekoppelde immunosorberende toets wat nie in plaas van Elisa gebruik word nie, maar eerder bykomend tot Elisa in laboratoriums gebruik word.
Wat is Elisa Assay?
Elisa is 'n ensiem-gekoppelde immunosorbent-toets wat die totale konsentrasie van afgeskeide seinproteïene bepaal. Dit is 'n wyd gebruikte analitiese biochemie-toets wat vir die eerste keer deur Engvall en Perlmann in 1971 beskryf is. Hierdie tegniek gebruik 'n vastefase tipe ensiem-immunotoets om die teenwoordigheid van 'n spesifieke proteïen in 'n vloeibare monster op te spoor deur teenliggaampies wat teen hierdie spesifieke proteïen gerig is, op te spoor. Hierdie toets is 'n algemeen gebruikte diagnostiese hulpmiddel in medisyne, plantpatologie en biotegnologie.
Meganisme van ELISA-toets
In die meeste van die ELISA-toets word 'n onbekende hoeveelheid antigeen aan die begin op 'n soliede ondersteuning (mikroliterplaat) geïmmobiliseer. Dan word die ooreenstemmende primêre teenliggaam oor die soliede ondersteuningsoppervlak toegedien. Hierdie teenliggaam vorm 'n kompleks met die antigeen (antigeen-teenliggaamkompleks). Die antigeengebonde primêre teenliggaam kan opgespoor word deur 'n sekondêre teenliggaam wat deur biokonjugasie aan 'n ensiem gekoppel is. In die laaste stap van die Elisa-toets word 'n stof wat die substraat van die ensiem bevat, bygevoeg. As daar 'n behoorlike binding van 'n primêre teenliggaam aan die antigeen is, word 'n waarneembare kleurverandering deur die substraat geproduseer. Uiteindelik kwantifiseer dit die antigeen in die monster.
Figuur 01: Verskillende tipes Elisa
Verder is daar verskillende benaderings tot Elisa, soos direkte Elisa en indirekte Elisa. Tans word verskeie Elisa-toetse gebruik om menslike patogene soos Mycobacterium tuberculosis, rotavirus, hepatitis B-virus, hepatitis C-virus, enterotoksien-produserende E.coli, MIV en SARS-CoV-2 op te spoor.
Wat is Elispot Assay?
Elispot is 'n ensiemgekoppelde immunosorberende toets wat individuele sitokienafskeiende selle opspoor. Cecil Czerkinsky het ELISpot die eerste keer in 1983 beskryf. Dit is 'n tipe toets wat daarop fokus om die frekwensie van sitokienafskeiding vir 'n enkele sel kwantitatief te meet. Dit word ook geklassifiseer as 'n tegniek wat teenliggaampies gebruik om 'n biologiese of chemiese proteïenanaliet op te spoor. Fluorospot-toets is 'n variasie van die Elispot-toets, wat fluoressensie gebruik om veelvuldige analiete (meer geheime proteïene) te ontleed.
Mechanism of Elispot Test
In hierdie meganisme word sitokienspesifieke monoklonale teenliggaampies aanvanklik by die putte van mikroliterplate gevoeg. Dan word die gewenste selle wat waargeneem word, by die putte gevoeg. Later word die selle geïnkubeer. Tydens die selinkubasie word die selle toegelaat om op enige stimuli te reageer en sitokien af te skei. Die sitokiene wat deur die geïnkubeerde selle afgeskei is, sal aan die teenliggaampies heg aangesien die selle omring word deur sitokienspesifieke monoklonale teenliggaampies.
Figuur 02: Elispot-toets
Om hierdie sitokienspesifieke monoklonale teenliggaampies op te spoor, word gebiotinileerde spesifieke detectie-teenliggaampies by die put gevoeg. Gebiotinileerde spesifieke opsporing teenliggaampies vang die sitokien spesifieke monoklonale teenliggaampies in die putte. Boonop word streptavidien-ensiem-konjugate by die putte gevoeg om met die opsporings-teenliggaampies te bind. In die laaste stap word spesifieke substrate by die putte gevoeg. Die reaksies van ensiemkonjugate en substrate produseer duidelike kolle in die putte. Hierdie afsonderlike kolle word op 'n outomatiese ELISpot-leser gelees. Uiteindelik sal dit die frekwensie van sitokienafskeiding verder bereken.
Wat is die ooreenkomste tussen Elisa en Elispot?
- Hulle is albei ensiemgekoppelde immunosorberende toetse.
- Albei toetse bespeur spesifieke proteïenanaliete.
- Hierdie toetse gebruik spesifieke teenliggaampies om die proteïenanaliete te identifiseer.
- Albei toetse gebruik ensieme en substrate.
- Hulle word as 'n diagnostiese hulpmiddel in mediese laboratoriums gebruik.
Wat is die verskil tussen Elisa en Elispot?
Elisa is 'n ensiem-gekoppelde immunosorbent-toets wat die totale konsentrasie van afgeskeide seinproteïene bepaal. Aan die ander kant is Elispot 'n ensiem-gekoppelde immunosorberende toets wat individuele sitokienafskeiende selle meet. So, dit is die belangrikste verskil tussen Elisa en Elispot. Boonop word die antigeen in die Elisa-toets eerstens op die mikroliterputte geïmmobiliseer. In teenstelling hiermee, in die Elispot-toets, word die teenliggaam eerstens op die mikroliterputte geïmmobiliseer. Dit is dus nog 'n verskil tussen Elisa en Elispot.
Die onderstaande infografika bied 'n gedetailleerde ontleding van die verskil tussen Elisa en Elispot in tabelvorm aan.
Opsomming – Elisa vs Elispot
Elisa en Elispot is twee ensiem-gekoppelde immunosorberende toetse wat wyd gebruik word in medisyne, plantpatologie, biotegnologie en verskillende farmaseutiese industrieë. Elisa bespeur die teenwoordigheid van 'n ligand (proteïen) in 'n vloeistofmonster deur gebruik te maak van teenliggaampies wat teen die ligand wat gemeet moet word, gerig is. Elispot-toets is 'n wyd gebruikte metode om immuunresponse te monitor. Dit bespeur individuele sitokienafskeiende selle deur teenliggaampies te gebruik. Dit is beide 'n immunoassay en bioassay tegniek. Dit is dus die opsomming van die verskil tussen Elisa en Elispot.
