Die sleutelverskil tussen mededingende en nie-mededingende ELISA is dat kompeterende ELISA 'n inhibisie-antigeen gebruik terwyl nie-mededingende ELISA nie 'n inhibisie-antigeen vir die toets gebruik nie.
Ensiemgekoppelde immunosorbenttoets (ELISA) is 'n immunologiese toets wat verskeie teikens soos teenliggaampies, antigene, proteïene en glikoproteïene opspoor. Dit is 'n vinnige en eenvoudige metode om uit te voer. Daarom word dit meer dikwels vir navorsings- en diagnostiese doeleindes gebruik. ELISA behels die gebruik van ensieme en die spesifieke binding van teenliggaampies en antigeen. Gebaseer op hoe die reaksies plaasvind, is daar vier tipes ELISA: direkte ELISA, indirekte ELISA, toebroodjie ELISA en inhibisie ELISA. Direkte, indirekte en toebroodjie ELISA is tipes nie-mededingende ELISA terwyl inhibisie ELISA 'n tipe volledige ELISA is. Die hoofdoel van hierdie artikel is om die verskil tussen mededingende en nie-mededingende ELISA te bespreek.
Wat is mededingende ELISA?
Kompeterende ELISA meet die antigeenkonsentrasie in 'n monster deur die opsporing van seininterferensie. Hier gebruik die toets 'n inhibeerantigeen. Daarom is dit 'n tipe inhibisie ELISA. Tydens hierdie prosedure kompeteer die antigene teenwoordig in die monster met die geselekteerde verwysingsantigeen vir binding aan 'n spesifieke hoeveelheid gemerkte teenliggaampies. Verder begin hierdie prosedure met die inkubasie van die monster, met die oortollige hoeveelheid gemerkte teenliggaampies. Die verwysingsantigeen moet ook vooraf op 'n meervoudige puttoetsplaat bedek word. Dan moet die monstermengsel by die toetsplaat gevoeg word wat die verwysingsantigeen bevat. Vrye teenliggaampies sal aan die verwysingsantigeen bind, afhangende van die hoeveelheid antigeen in die monster. Dus, as meer monsterantigeen teenwoordig is, sal minder verwysingsantigeen opgespoor word. Dit skep dus 'n swakker sein.
Figuur 01: ELISA
In teenstelling, wanneer die monster minder hoeveelheid antigeen bevat, sal meer en meer verwysingsantigeen die teenliggaampies beset en 'n sterk sein gee. Aangesien kompeterende ELISA 'n sterker sein gee wanneer die monster 'n lae hoeveelheid antigene bevat, is kompeterende ELISA 'n baie sensitiewe toets, selfs vir monsters met 'n klein aantal antigene.
In sommige mededingende ELISA-stelle word 'n gemerkte antigeen gebruik in plaas van 'n gemerkte teenliggaam. Hier sal die gemerkte antigeen en die monsterantigeen meeding vir binding aan die primêre teenliggaam. Net so, wanneer die hoeveelheid antigeen in die monster laag is, sal die hoeveelheid gemerkte antigeen wat aan teenliggaampies bind hoër wees en 'n sterker sein skep.
Wat is nie-mededingende ELISA?
Tussen die vier tipes ELISA is drie tipes nie-mededingende ELISA. Hulle is direkte ELISA, indirekte ELISA en toebroodjie ELISA. Al drie formate werk onder die algemene beginsel van ELISA met geringe verskille in hul metodologieë.
Direct ELISA gebruik 'n ensiem-gemerkte primêre teenliggaam. Dit benodig dus nie 'n sekondêre teenliggaam nie. Daarom is direkte ELISA vinniger as ander tipes ELISA. Die primêre teenliggaam sal direk bind aan die geïmmobiliseerde teikenantigeen wat in die plaat teenwoordig is. Gevolglik sal die ensiem-substraat reaksie plaasvind, wat 'n sigbare sein produseer.
Figuur 02: Toebroodjie ELISA
Anders as direkte ELISA, gebruik indirekte ELISA 'n ongemerkte primêre teenliggaam en 'n ensiem-gemerkte sekondêre teenliggaam. Sodra die primêre teenliggaam aan die geïmmobiliseerde antigeen bind, bind die sekondêre teenliggaam aan die primêre teenliggaam. Die ensiem in die sekondêre teenliggaam sal met die antigeen reageer en 'n sigbare sein produseer. Toebroodjie ELISA verskil van beide direkte en indirekte ELISA. Hier word die teenliggaam teen die wand van die toetsplaat geïmmobiliseer.
Wat is die ooreenkomste tussen mededingende en nie-mededingende ELISA?
- Kompeterende en nie-mededingende ELISA is twee tipes immunosorberende toetstegnieke.
- Hulle is baie buigsaam en sensitiewe tegnieke.
- Verder is beide mededingende en nie-mededingende ELISA ensiemgekoppelde immunotoetse.
- Albei metodes genereer ook 'n sein as gevolg van 'n ensiem-substraatreaksie.
Wat is die verskil tussen mededingende en nie-mededingende ELISA?
Kompeterende ELISA is 'n tipe ELISA wat staatmaak op die voltooiing tussen analiet-antigeen en gemerkte antigeen vir 'n beperkte hoeveelheid spesifieke teenliggaampies. Aan die ander kant bestaan daar nie so 'n kompetisie tussen antigeen van belang en verwysingsantigeen in nie-mededingende ELISA nie. Dit is dus die belangrikste verskil tussen mededingende en nie-mededingende ELISA. Net so is kompeterende ELISA 'n inhibisie ELISA terwyl nie-mededingende ELISA nie 'n inhibisie ELISA is nie. So, dit is ook 'n verskil tussen mededingende en nie-mededingende ELISA.
Boonop is mededingende ELISA meer geskik om 'n lae hoeveelheid antigeen van belang te meet. Dit is 'n sensitiewe metode. Aan die ander kant hang nie-mededingende ELISA nie af van die aantal antigene wat in 'n monster teenwoordig is nie. Daarom is dit ook 'n verskil tussen mededingende en nie-mededingende ELISA.
Infografika hieronder verduidelik die verskil tussen mededingende en nie-mededingende ELISA vergelykend.
Opsomming – Mededingend vs nie-mededingende ELISA
Kompeterende en nie-mededingende ELISA is die twee hooftipes ELISA of ensiemgekoppelde immunosorberende toetse. In die opsomming van die verskil tussen mededingende en nie-mededingende ELISA, maak die kompeterende ELISA staat op die kompetisie tussen antigeen van belang en verwysingsantigeen teenoor die beperkte hoeveelheid teenliggaampies. Daarom word kompeterende ELISA ook as inhibisie-ELISA genoem. Aan die ander kant maak nie-mededingende ELISA nie staat op die kompetisie tussen teikenantigene en verwysingsantigeene nie. Dit gebruik 'n oormaat gemerkte spesifieke teenliggaampies teenoor die analiet van belang. Dit is dus die belangrikste verskil tussen mededingende en nie-mededingende ELISA. Direkte ELISA, indirekte ELISA en toebroodjie-ELISA is die drie hooftipes nie-mededingende ELISA.
