Die sleutelverskil tussen radioaktiewe en nie-radioaktiewe probes is dat radioaktiewe probes enkelstring-DNA- of RNA-volgordes is wat met radioaktiewe isotope gemerk is, terwyl nie-radioaktiewe probes enkelstring-DNA of RNA-volgordes is wat met 'n chemiese merker of 'n fluoresserende merker.
Nukleinsuurhibridisasie is 'n belangrike tegniek in molekulêre biologie, veral in mikrobiese diagnose. Dit help om 'n spesifieke nukleïensuurvolgorde te identifiseer of op te spoor. In hierdie tegniek word nukleïensure aan 'n soliede oppervlak vasgemaak en met 'n sonde gehibridiseer. 'n Sonde is 'n fragment van DNA of RNA wat komplementêr is tot 'n reeks van belang. Indien die teikenvolgorde in die monster teenwoordig is, sal die sonde daarmee hibridiseer en dit waarneembaar maak. Daar is twee tipes sondes as radioaktiewe en nie-radioaktiewe sondes. Daarom kan ons die probes met 'n radioaktiewe merker of 'n fluoresserende merker merk.
Wat is radioaktiewe sondes?
Radioaktiewe probes is die enkelstrengige DNA- of RNA-fragmente met 'n radioaktiewe merker. Radio-isotope word gebruik in die voorbereiding van radioaktiewe probes. Radio-isotope 32P, 33P en 35S word algemeen gebruik in die etikettering van probes. Boonop word radio-isotope 3H en 1251 ook in 'n mindere mate in die etikettering van probes gebruik. Maar hulle word vir spesifieke toepassings gebruik. Onder verskillende radio-isotope is 32P die isotoop wat die meeste gebruik word in die etikettering van radioaktiewe probes.
Radioaktiewe probes bied 'n hoër mate van betroubaarheid en spesifisiteit. Daarom bied hulle maksimum sensitiwiteit en laat akkurate kwantifisering van teikenvolgordes toe. Daar is egter verskeie nadele verbonde aan radioaktiewe probes. Hulle het kort halfleeftye. Boonop is hulle gevaarlik en produksie, gebruik en wegdoening is problematies tydens hantering. Daarbenewens is die voorbereiding van radioaktiewe sonde 'n duur proses. Daarom, as gevolg van die veiligheidskwessies en koste, word radioaktiewe sondes nie deesdae as nie-radioaktiewe sondes gebruik nie.
Wat is nie-radioaktiewe sondes?
Nie-radioaktiewe probes is die tweede tipe probes wat chemies gemerk is. Digoksigenien is 'n nie-radioaktiewe sonde, wat 'n teenliggaam-gebaseerde merker is. Digoksigenien probes is spesifiek en sensitief. Biotien is 'n ander etiket wat gebruik word in nie-radioaktiewe sonde voorbereiding. Biotien/Streptavidien en Digoksigenien/Teenliggaam-opsporingstelsels is die mees gebruikte nie-radioaktiewe probes in hibridisasie. Verder is peperwortelperoksidase-stelsel 'n ander nie-radioaktiewe sondestelsel. Sodra hierdie nie-radioaktiewe probes met die teikenvolgordes gehibridiseer is, kan hulle deur outoradiografie of ander beeldtegnieke opgespoor word.
Figuur 01: Hibridisering met nie-radioaktiewe probes
Nie-radioaktiewe probes word meer dikwels in nukleïensuurhibridisasie as radioaktiewe probes gebruik. Dit is omdat nie-radioaktiewe probes nie met gevaarlike materiale geassosieer word nie. Verder vereis nie-radioaktiewe opsporingsmetodes korter blootstellingstye om die hibridisasiesein op te spoor. Die stappe betrokke by DNA-hibridisasie met nie-radioaktiewe probes is egter gewoonlik vervelig en tydrowend. Boonop is kommersieel beskikbare oplossings duur.
Wat is die ooreenkomste tussen radioaktiewe en nie-radioaktiewe sondes?
- Radioaktiewe en nie-radioaktiewe probes is twee tipes probes wat in nukleïensuurhibridisasie gebruik word.
- Hulle fasiliteer die opsporing van teikenreekse in die monster.
- Albei soorte sondes is ewe sensitief en spesifiek.
Wat is die verskil tussen radioaktiewe en nie-radioaktiewe sondes?
Radioaktiewe probes is die enkelstring-DNA- of RNA-volgordes wat met radioaktiewe isotope gemerk is, terwyl nie-radioaktiewe probes die enkelstring-DNA of RNA-volgordes is wat met 'n chemiese merker gemerk is. Dus, dit is die belangrikste verskil tussen radioaktiewe en nie-radioaktiewe probes. Radioaktiewe isotope is ook gevaarlik. Gevolglik is radioaktiewe sondes aansienlik gevaarlik, terwyl nie-radioaktiewe sondes nie gevaarlik is nie.
Boonop is nog 'n verskil tussen radioaktiewe en nie-radioaktiewe sondes hul nadele. Kort halfleeftye en die gevare verbonde aan die produksie, gebruik en wegdoening daarvan is die nadele van die gebruik van radioaktiewe probes. Aan die ander kant is die stappe betrokke by DNA-hibridisasie met nie-radioaktiewe probes gewoonlik vervelig en tydrowend.
Infografika hieronder toon meer vergelykings wat verband hou met die verskil tussen radioaktiewe en nie-radioaktiewe probes.
Opsomming – Radioaktiewe vs nie-radioaktiewe sondes
'n Sonde is 'n fragment van DNA of RNA wat 'n nukleotiedvolgorde bevat wat komplementêr is tot die volgorde van belang. Om die teikenvolgorde op te spoor, kan die probes radioaktief, fluoresserend of chemies gemerk word. Probes bind met komplementêre rye in die monster. Radioaktiewe probes word gemerk met radioaktiewe isotope terwyl nieradioaktiewe probes gemerk is met biotien, digoksigenien of peperwortelperoksidase. Dit is dus die sleutelverskil tussen radioaktiewe en nieradioaktiewe probes.
