Sleutelverskil – Kapillêre elektroforese vs gelelektroforese
Elektroforese is 'n tegniek wat gebruik word om biomolekules te skei op grond van die deeltjielading, deeltjiegrootte en die deeltjievorm. Die migrasie van die molekule, bekend as elektroforetiese mobiliteit, hang af van die tipe polimeer/gel wat gebruik word, sy porieë, die spanning verskaf, looptyd en die oppervlak tot volume verhouding. Daar is verskillende tipes elektroforese tegnieke gebaseer op die tipe biomolekule wat gebruik word. Die eerste tipe elektroforese wat uitgevind is, was papierelektroforese waar 'n nitrosellulose papier gebruik is as die medium vir die skeiding van biomolekules. Die beginsel van gelelektroforese waar verskillende porieëgrootte gels gebruik is om biomolekules te skei, is later uitgevind. Gelelektroforesetegniek is verder aangepas om die akkuraatheid van die tegniek te verbeter, en een so 'n modifikasie is kapillêre elektroforese. Die sleutelverskil tussen kapillêre elektroforese en gelelektroforese is dat gelelektroforese in 'n vertikale of horisontale vlak uitgevoer word deur 'n polimeergel van standaard poriegrootte te gebruik, terwyl kapillêre elektroforese in 'n kapillêre buis met 'n polimeervloeistof of 'n gel uitgevoer word.
Wat is gelelektroforese?
Gelelektroforese is 'n tegniek wat gebruik word om hoofsaaklik nukleïensure, proteïene of aminosure te skei op grond van die lading, grootte en vorm daarvan. Hierdie tegniek gebruik 'n fisiese jel, wat 'n polimeerstof is, as die skeidingsmedium. Mees algemeen gebruikte gels is Agarose (vir nukleïensuurskeiding) en Poliakrielamied (vir proteïenskeiding). Die gel elektroforetiese apparaat bevat die gel gietbak om die gel voor te berei, gietkamme om die putte voor te berei, buffertenk, elektrodes – positief (anode) en negatief (katode) en die spanningtoevoereenheid. Molekules soos DNA of RNA, wat negatief gelaai is, beweeg van die katode na die anode en molekules wat positief gelaai is, beweeg andersom. Gelvoorbereiding word volgens die vereiste gedoen. Indien 'n hoë resolusie of skeiding van molekules vereis word, moet 'n hoë konsentrasie jel met 'n kleiner poriegrootte voorberei word. Die molekules wat op die jelmatriks geskei is, word na 'n kleurtegniek waargeneem. Die geskeide molekules verskyn as bande op die jelmatriks.
Figuur 01: Gelelektroforese
Gelelektroforese word gebruik in molekulêre diagnostiek soos DNS-vingerafdrukke om die teenwoordigheid van 'n spesifieke DNS/RNA-fragment of 'n proteïen te bepaal. Gelelektroforese bepaal ook die suiwerheid van die onttrekte biomolekulemonster. Gelelektroforese word uitgevoer as 'n voorlopige stap vir in- en hibridisasie en as 'n bevestigende analise na volgordebepaling.
Wat is kapillêre elektroforese?
Kapillêre elektroforese is 'n modifikasie van gelelektroforese wat dieselfde beginsel van skeiding gebruik gebaseer op lading, grootte van die molekule, maar word uitgevoer in 'n kapillêre buis met óf 'n jelstof óf 'n vloeibare polimeer. Kapillêre word van saamgesmelte silika voorberei, en elke kapillêre buis het 'n inwendige deursnee van 50-100μm en is 25-100cm lank. Monsters word in die kapillêre buis wat die polimeermateriaal bevat ingespuit en word baie vinnig geskei as die konvensionele jelelektroforese. Die kapillêre stelsel is goed beskerm binne 'n isolator baadjie wat die monster teen enige besoedeling beskerm. Kapillêre kan gevul word met vloeibare polimere soos hidroksieletielsellulose of hoë-resolusie gels soos poliakrielamied. Kapillêre elektroforese bied groter resolusie; dus is skeiding meer akkuraat. Kapillêre elektroforese gebruik 'n outomatiese detektorstelsel via spektrofotometriese analise. Dit is as gevolg van die hoër oppervlakte-tot-volume-verhouding.
Figuur 02: Kapillêre Elektroforese
Kapillêre elektroforese word gebruik in situasies soos in forensiese ondersoeke waar hoër akkuraatheid vereis word en word nie algemeen gebruik nie aangesien dit duur tegniek is.
Wat is die ooreenkomste tussen kapillêre elektroforese en gelelektroforese?
- Skeiding van molekules in beide tegnieke is gebaseer op die lading en grootte van die molekule.
- Albei tegnieke kan gebruik word om beide nukleïensure en proteïene te skei.
- Die monstervolume van die beide tegnieke is dieselfde.
- Albei tegnieke gebruik 'n buffer om skeiding te vergemaklik.
Wat is die verskil tussen kapillêre elektroforese en gelelektroforese?
Kapillêre elektroforese vs gelelektroforese |
|
| Kapillêre elektroforese is 'n tegniek wat biomolekules op 'n kapillêre buis skei deur 'n vloeibare of gel polimeermedium te gebruik. | Gelelektroforese is 'n tegniek wat biomolekules op 'n vertikale of horisontale vlak skei deur 'n polimeergelmedium te gebruik. |
| Skeiding | |
| In kapillêre elektroforese word skeiding binne 'n kapillêre buis gedoen. | In gelelektroforese word skeiding op 'n vertikale of horisontale vlak gedoen. |
| Medium van skeiding | |
| Vloeibare polimere soos hidroksielsellulose word in kapillêre elektroforese gebruik. | Jels, hetsy agarose of poliakrielamied, word as 'n medium in gelelektroforese gebruik. |
| Kruisskakeling | |
| Hoë resolusie kan verkry word vanaf kapillêre elektroforese. | Resolusie is laag in gelelektroforese. |
| Opervlakte-tot-volumeverhouding | |
| Opervlakte-tot-volumeverhouding is hoog in kapillêre elektroforese. | Opervlakte-tot-volumeverhouding is laag in gelelektroforese. |
| Opsporingstegniek | |
| Opsporing word gedoen deur spektrofotometriese outomatiese detektors in kapillêre elektroforese. | Vlek en waarneming deur UV-transilluminator word gedoen as opsporingstegnieke in gelelektroforese. |
Opsomming – Kapillêre elektroforese vs gelelektroforese
Molekulêre diagnostiek speel 'n groot rol in die wetenskaplike wêreld. Identifikasie en suiwering van DNA, RNA en proteïene is kritieke stappe in die diagnostiese prosedures. Elektroforese is 'n tegniek wat biomolekules skei en identifiseer in beide gelelektroforese en die baie gevorderde kapillêre gelelektroforese. Gelelektroforese word in 'n vertikale of horisontale vlak uitgevoer deur 'n polimeergel van standaard poriegrootte te gebruik, terwyl kapillêre elektroforese in 'n kapillêre buis met 'n polimeervloeistof of 'n gel uitgevoer word. Dit is die verskil tussen kapillêre elektroforese en gelelektroforese. Na voltooiing van die elektroforese tegniek, word die biomolekules verder verwerk om hoër vlak inligting te verkry via hibridisasie of deur tegnieke soos vingerafdrukke.
Laai PDF-weergawe van kapillêre elektroforese vs gelelektroforese af
Jy kan die PDF-weergawe van hierdie artikel aflaai en dit vir vanlyn doeleindes gebruik soos per aanhalingsnota. Laai asseblief PDF-weergawe hier af Verskil tussen gelelektroforese en kapillêre elektroforese.
