Sleutelverskil – In Situ Hibridization vs Immunohistochemistry
Kanker- en aansteeklike siektediagnostiek is 'n gewilde neiging waar nuwe proteomika- en genomika-gebaseerde tegnieke gebruik word vir die doel om gewasse of aansteeklike selle, die verspreiding daarvan en die plekke van selontwikkeling te identifiseer en die genetiese basis van die mees oordraagbare en nie-oordraagbare siektes. Dit sal lei tot akkurate geneesmiddelverwerking en -ontwerp en in die ontwikkeling van pasgemaakte terapieë vir siektes. In situ hibridisasie (ISH) en Immunohistochemistry (IHC) is twee sulke wyd gebruikte tegnieke in kankerbiologie en die sleutelverskil tussen in situ hibridisasie en immunochemie lê in die molekules wat in die ontledingsprosedure gebruik word. In ISH word die nukleïensuurprobes in analise gebruik, terwyl, in IHC, monoklonale en poliklonale teenliggaampies gebruik word vir die diagnostiese bepalings.
Wat is In Situ Hibridization (ISH)?
In situ hibridisasie is 'n nukleïensuur hibridisasie tegniek wat direk uitgevoer word op 'n gedeelte of gedeelte van weefsel, in die hele weefsel of in selle. Die tegniek hang af van die teorie van Watson Crick komplementêre basisparing, wat lei tot óf DNA-DNS-basters óf DNA-RNA-basters wat gemuteerde gene kan opspoor of die vereiste geen van belang kan identifiseer. Enkelstrengs DNS-volgordes, dubbelstrengs DNS-volgordes, enkelstrengs RNS-volgordes of sintetiese oligonukleotiedvolgordes word as probes tydens hibridisasietegniek gebruik, en hierdie probes word gemerk met 'n radioaktiewe fosfor aan sy 5'-punt vir identifikasieprosedures tydens outoradiografie of gemerk met fluoresserende kleurstowwe. Daar is verskillende tipes ISH-tegnieke beskikbaar gebaseer op die tipe sonde wat gebruik word en die tipe visualiseringstegniek wat gevolg word.
Figuur 01: Fluorescent In Situ Hibridization
Daar is baie toepassings van ISH, hoofsaaklik in die molekulêre diagnostiek van aansteeklike siektes om die teenwoordigheid van patogene te identifiseer en om die patogeen deur middel van molekulêre diagnostiek te bevestig. Dit word ook gebruik in die velde van ontwikkelingsbiologie, kariotipering en filogenetiese analise en fisiese kartering van chromosome.
Wat is Immunohistochemie (IHC)?
In die tegniek van IHC is die hoofmolekule wat ontleed is die antigeen. Tydens IHC word monoklonale en poliklonale teenliggaampies gebruik om die teenwoordigheid van antigene by infeksie of kwaadaardige selproliferasiestatus te bepaal. Die tegniek is gebaseer op antigeen-teenliggaambinding, en ensiemetikette word vir hierdie tegniek gebruik; een so 'n toepassing is die ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay). Die merkers kan ook fluoresserende teenliggaampies of radio-gemerkte teenliggaampies wees.
Figuur 02: Immunohistochemie
IHC word wyd gebruik vir die opsporing van kankerselle. Die diagnostiese prosedures teiken die antigene wat op die tumorselle teenwoordig is om die gewas te identifiseer en te karakteriseer. Dieselfde prosedure word ingewerk om aansteeklike middels te diagnoseer. Monoklonale en Poliklonale teenliggaampies word ook gebruik om verskillende geenprodukte te ontleed deur die teenliggaam-antigeen-bindingsreaksie tussen die verlangde proteïen en die sintetiese teenliggaam wat toegedien word moontlik te maak.
Wat is die ooreenkomste tussen in situ hibridisering en immunohistochemie?
- ISH en IHC is hoogs spesifieke reaksies.
- Albei tegnieke is hoogs akkuraat.
- Albei tegnieke kan gebruik word in diagnostiek vir kanker en aansteeklike siektes.
- Hierdie tegnieke word in steriele in-vitro-omgewings uitgevoer.
- Albei is vinnige tegnieke wat reproduceerbare resultate verskaf.
- ISH en IHC gebruik opsporingsmetodes soos radio-etikettering en fluoressensietegnieke.
Wat is die verskil tussen in situ hibridisering en immunohistochemie?
In Situ Hibridization vs Immunohistochemistry |
|
| ISH is 'n nukleïensuurhibridisasietegniek wat direk op 'n gedeelte of gedeelte van weefsel of die hele weefsel uitgevoer word. | IHC is 'n tegniek waar monoklonale en poliklonale teenliggaampies gebruik word om die teenwoordigheid van antigene te bepaal, wat spesiale proteïenmerkers is wat op die seloppervlaktes geplaas word. |
| Tipe biomolekules ontleed | |
| ISH ontleed nukleïensure. | IHC ontleed proteïene-antigene. |
| Basis van biochemiese reaksie | |
| Komplimentêre basisparing tussen DNA-DNA of DNA-RNA vind in hierdie tegniek plaas. | Antigeen-teenliggaam-interaksies is betrokke by immunohistochemie. |
| Ensiemgekoppelde opsporingmetodes | |
| Ensiemgekoppelde opsporingsmetodes kan nie in ISH gebruik word nie. | Ensiemgekoppelde opsporingsmetodes kan in IHC gebruik word. |
Opsomming – In Situ Hibridization vs Immunohistochemistry
Molekulêre diagnostiek is vinnige en bevestigende metodes wat gebruik kan word om 'n nie-oordraagbare siekte soos kanker of oordraagbare siekte soos MIV of Tuberkulose te identifiseer gebaseer op die molekulêre merkers teenwoordig op die selle wat lei tot die manifestasie van die siekte. Molekulêre merkers kan teenwoordig wees in die vorm van uitgedrukte proteïene of op die genetiese vlak, gebaseer op wat verskillende nuwe tegnieke ingestel word om doeltreffendheid te verhoog en is minder moeisaam, alhoewel daar 'n hoë koste aan hierdie tegnieke verbonde is. Dus is ISH afhanklik van DNA-DNA of DNA-RNA baster vorming, en IHC hang af van die spesifieke reaksies tussen teenliggaampies en antigeen. Dit is die verskil tussen in situ hibridisasie.
Laai PDF-weergawe van In Situ Hibridization vs Immunohistochemistry af
Jy kan die PDF-weergawe van hierdie artikel aflaai en dit vir vanlyn doeleindes gebruik soos per aanhalingsnota. Laai asseblief PDF-weergawe hier af. Verskil tussen in situ hibridisering en immunohistochemie.
