Sleutelverskil – Transformante vs Rekombinante
Rekombinasie en transformasie is twee deurslaggewende stappe in genetiese ingenieurswese, waar die eienskappe van 'n organisme doelbewus gewysig word deur sy genetiese materiaal te manipuleer. Rekombinasie is 'n proses waarin vreemde DNA in 'n vektorgenoom geïnkorporeer word en rekombinante DNA-molekule gevorm word. Transformasie is die volgende stap waarin rekombinante molekule in die gasheerorganisme ingevoer word. Die gasheersel of die organisme fasiliteer uitdrukking van die rekombinante molekule. Die sleutelverskil tussen transformante en rekombinante is dat transformante die selle of die organismes is wat rekombinante molekule binne neem en uitdrukking vergemaklik, terwyl rekombinante die vektore is wat die invoeging van die vreemde DNA in sy genoom moontlik maak en na gasheertransformante vervoer vir uitdrukking.
Wat is transformante?
Transformante is die selle of die organismes waarin rekombinante DNA opgeneem word vir die uitdrukking. Bakterieë word algemeen gebruik as gasheerorganismes in genetiese ingenieurswese aangesien dit maklik is om te groei, vermeerder en onder laboratoriumtoestande te hanteer en transformasieproses maklik is in vergelyking met ander organismes. Die gewildste gasheerbakterie wat in genetiese ingenieurswese gebruik word, is bakterie E coli.
Tydens die transformasieproses word gasheerselle geïnduseer om die rekombinante op te neem. Sommige gasheerselle neem egter nie rekombinante molekules op nie. Hulle staan bekend as nie-transformante en die selle wat rekombinante DNA-molekules binne bevat staan bekend as transformante. Seleksie van transformante uit nietransformante word gedoen deur gebruik te maak van selekteerbare merkers in molekulêre biologie. Selekteerbare merkers word saam met die DNA-insetsel in vektorgenoom ingevoeg. Algemeen gebruikte selekteerbare merkers is antibiotika-weerstandige gene. Merkergene fasiliteer die differensiasie van transformante en gaan voort met die proses. Na die transformasieproses word bakterie in 'n antibiotika-bevattende medium gekweek. Slegs die transformante is in staat om op daardie medium te groei aangesien hulle die rekombinante binne besit.
Sodra die rekombinante DNS-molekule binne-in die gasheerorganisme getransformeer is, kan die vreemde DNS óf in die gasheerselgenoom geïntegreer word óf nie-geïntegreer in die sitoplasma bly nie. Die uitdrukking en replikasie van die vreemde DNA vind egter in die gasheerorganisme plaas en lewer die gewenste resultaat uit die proses.
Wat is rekombinante?
'n Rekombinant is 'n organisme of 'n sel wat 'n herkombineerde genoom besit wat vreemde DNA bevat. Rekombinante is 'n resultaat van die genetiese ingenieursproses. Hulle word kunsmatig in vitro gekonstrueer deur die gene van belang in te voeg en die genoom te wysig. Dikwels tree bakteriële plasmiede en bakteriofage op as rekombinante in genetiese ingenieurswese. Dit het chimera van verskillende DNA's. Rekombinante DNA-molekule dra vreemde DNA na die gasheerorganisme en laat dit die verlangde produk uitdruk en vorm.
Rekombinante molekules word gekonstrueer deur gebruik te maak van beperking-endonukleases en DNA-ligases. Die verlangde DNA-fragment word van die oorspronklike organisme geskei en in die vektor ingevoeg om die rekombinante vir transformasie te maak. Sny van die geen van belang en oopmaak van die vektororganisme moet gedoen word deur dieselfde beperkingsensiem te gebruik om versoenbare taai punte te skep om hulle saam te voeg. Sodra die vreemde DNA in die vektorgenoom geïnkorporeer is, staan dit bekend as rekombinante of die rekombinante DNA-molekule.
Figuur 02: Rekombinante DNA
Wat is die verskil tussen Transformante en Rekombinante?
Transformante vs Rekombinante |
|
| Transformante is die selle wat 'n rekombinante DNA-molekule binne het. | Rekombinante is die draermolekules wat vreemde DNA het wat in eie genoom ingevoeg is. |
| Uitdrukking van vreemde DNA | |
| Hulle is die gasheerselle wat in staat is om die rekombinante DNA uit te druk. | Hulle behoort self in die gasheerorganisme te kan repliseer. |
| Seleksie | |
| Selle wat maklik gekweek en vermeerder kan word, word as gasheerselle gekies. | Hulle moet maklik uittrekbaar wees en moet kiesbare merkers bevat. |
Opsomming – Transformante vs Rekombinante
Transformante is die selle of organismes met rekombinante DNA-molekules daarin. Rekombinante is die organismes of die selle wat genetiese rekombinasie ondergaan het en vreemde DNA binne hul genome het. Bakteriese selle word dikwels as gasheerselle vir transformasie gebruik en plasmiede en bakteriofage word dikwels as vektore in rekombinante DNA-tegnologie gebruik. Dit is die verskil tussen transformante en rekombinante.
