Die belangrikste verskil tussen gis een baster en gis twee baster is dat gis een baster 'n in vitro gebaseerde toets is om DNA-proteïen interaksies te analiseer terwyl gis twee baster 'n in vitro gebaseerde toets is om proteïen-proteïen interaksies te ontleed.
Die bestudering van die interaksies tussen sellulêre molekules kan help om herkenningsplekke betrokke by geenuitdrukking en proteïenbane te definieer. DNA- en proteïeninteraksies is 'n integrale deel van sellulêre prosesse soos DNA-modifikasies en transkripsionele regulering, ens. Aan die ander kant speel proteïen- en proteïeninteraksies belangrike rolle in sellulêre prosesse soos replikasie, transkripsie, translasie en seintransduksie. Daarom is dit krities belangrik om hierdie interaksies van sellulêre molekules deur verskillende toetse te identifiseer. Gis een baster en gis twee baster is twee in vitro-gebaseerde toetse om DNA-proteïen- en proteïen-proteïen-interaksies te ontleed.
Wat is Yeast One Hybrid?
Yeast one baster (Y1H) is 'n in vitro-gebaseerde toets om intrasellulêre DNA-proteïen-interaksies te ontleed. Hierdie metode is die eerste keer in 1993 deur Wang en Reed gevestig. Sedertdien het dit 'n groter krag in biologiese navorsing getoon. In hierdie toets is daar twee hoofkomponente: DNA-aas en proteïenprooie.
Figuur 01: Yeast One Hybrid
In die prosedure word 'n DNS-volgorde (DNA-aas) eers stroomop van twee verskillende verslaggewers (HIS3, LacZ) gekloon. Hierdie verslaggewerkonstrukte is geïntegreer in die genoom van 'n gisstam. Transkripsiefaktore word as proteïenprooi geneem. Transkripsiefaktore word saamgesmelt met die transkripsionele aktiveringsdomein (AD) van gis Gal4 transkripsiefaktor om basterproteïene te maak. Hierdie hele basterproteïen word in 'n plasmied geïntegreer voordat dit in die gisras ingebring word. Na die bekendstelling van die rekombinante plasmied, wanneer die transkripsiefaktor met die DNA-fragment in wisselwerking tree, aktiveer die AD-eenheid die verslaggewergeenuitdrukking (HIS3of LacZ). Opeenvolging van die plasmiede laat die identifikasie van die transkripsiefaktor toe wat aan die DNA-fragment kan bind. Onlangs is gis een bastermetode gebruik om siektediagnose na te vors. Daarom sal hierdie toets in die toekoms meer algemeen in wetenskaplike navorsing en mediese behandelings gebruik word.
Wat is Yeast Two Hybrid?
Yeast two baster (Y2H) is 'n in vitro-gebaseerde toets om intrasellulêre proteïen- en proteïeninteraksies te ontleed. Hierdie metode is oorspronklik deur Stanley Fields en Ok-Kyu Song in 1989 gevind. Hierdie tegniek bespeur proteïen-proteïen-interaksies deur die Gal4-transkripsiefaktor van die gis te gebruik.
Figuur 02: Yeast Two Hybrid
In hierdie metode word twee samesmeltings (basters) eers gekonstrueer deur gebruik te maak van proteïene van belang: die samesmelting van een proteïen met DNA-bindende domein (DBD) en deur die samesmelting van die ander proteïen met die aktiveerderdomein (AD) van die Gal4-transkripsiefaktor. Die proteïen wat met DBD saamgesmelt is, staan bekend as aas, terwyl die proteïen wat met AD saamgesmelt is, as prooi bekend staan. In die gisstam, met die interaksie van die aas en prooi, word die DBD en AD in die nabyheid gebring om 'n funksionele Gal4-transkripsiefaktor stroomop van die verslaggewergeen te genereer. Die funksionele transkripsiefaktor aktiveer verslaggewergeenuitdrukking. Verder word hierdie metode tans gebruik om die interaksies van integrale membraanproteïene in soogdierselle te sift.
Wat is die ooreenkomste tussen gis een baster en gis twee baster?
- Gis een baster en gis twee baster is twee in vitro-gebaseerde toetse om DNA-proteïen- en proteïen-proteïen-interaksies te ontleed.
- Hierdie toetse gebruik gisrasse.
- Albei toetse gebruik die aktiveringsdomein (AD) van die Gal4-transkripsiefaktor.
- Hulle gebruik verslaggewergeen (HIS3, of LacZ) uitdrukking om interaksies op te spoor.
- Hulle het aas en prooi.
- Albei toetse is baie nuttig in moderne biologiese navorsing.
Wat is die verskil tussen gis een baster en gis twee baster?
Gis een baster is 'n in vitro gebaseerde toets om DNA en proteïen interaksies te analiseer terwyl gis twee baster 'n in vitro gebaseerde toets is om proteïen en proteïen interaksies te ontleed. Dit is dus die belangrikste verskil tussen gis een baster en gis twee baster. Verder, in gis een baster, is lokaas 'n DNA-fragment, en prooi is 'n proteïenmolekule. Aan die ander kant, in gis twee baster, is beide aas en prooi proteïenmolekules.
Die onderstaande infografika lys die verskille tussen gis een baster en gis twee baster in tabelvorm vir vergelyking langs mekaar.
Opsomming – Gis een baster vs gis twee baster
Gis een baster en gis twee baster is twee belangrike in vitro-gebaseerde toetse. Gis een baster is 'n in vitro gebaseerde toets om DNA en proteïen interaksies te ontleed terwyl gis twee baster 'n in vitro gebaseerde toets is om proteïen en proteïen interaksies te ontleed. Dit is dus die sleutelverskil tussen gis een baster en gis twee baster.
