Die sleutelverskil tussen elektroporasie en mikro-inspuiting is dat elektroporasie 'n tegniek is wat 'n hoëspanning elektriese pols gebruik om DNS in gasheerselle af te lewer, terwyl mikro-inspuiting 'n tegniek is wat 'n fynpunt glasnaald of mikropipet gebruik om DNS in te lewer gasheerselle.
Transformasie is die proses waardeur vreemde DNA na gasheerselle oorgedra word. Deur transformasie kan die genetiese samestelling van die organisme verander word. Daar is verskillende chemiese, biologiese en fisiese transformasiemetodes. Sommige is direkte metodes, terwyl sommige indirekte metodes is. Elektroporasie en mikro-inspuiting is twee fisiese metodes wat direkte transformasiemetodes is. Elektroporasie gebruik 'n elektriese veld om mikroskopiese porieë in biologiese selmembrane te induseer om DNS in gasheerselle te inkorporeer. Mikro-inspuiting, aan die ander kant, lewer DNS direk met behulp van 'n mikropipet of fyn punt glas naald.
Wat is Elektroporasie?
Elektroporasie is 'n transformasietegniek wat DNS in plantselle en protoplaste lewer. Hierdie tegniek gebruik 'n hoëspanning elektriese pols. Plantmateriaal word in 'n bufferoplossing met DNA geïnkubeer. Dan word die oplossing aan 'n hoëspanning elektriese pols onderwerp. Hoëspanning-geïnduseerde porieë word in plantselmembrane geskep, en deur hierdie porieë migreer DNS binne die selle en integreer met plantgenomiese DNS. Die doeltreffendheid van hierdie metode hang af van plantmateriaal en behandelingstoestande.
Figuur 01: Elektroporasie
Wanneer die transformasie met behulp van elektroporasie gedoen word, ontvang slegs 40 tot 50 % van selle DNA. Boonop kan slegs 50 % van die getransformeerde selle onder hierdie metode oorleef. Hierdie metode is egter maklik om uit te voer en verander nie die biologiese struktuur of funksie van selle nie. Boonop kan dit vir 'n wye reeks selle gebruik word.
Wat is mikro-inspuiting?
Mikro-inspuiting is 'n transformasietegniek wat veral nuttig is wanneer DNA in groot selle ingebring word. Hierdie metode gebruik 'n fyn puntige glasnaald of 'n mikropipet om DNA in plantprotoplaste of dierselle (oösiete, eiers en embrio's) te lewer. Trouens, hierdie metode is meer geskik vir die maak van transgeniese diere soos muise. In hierdie metode word DNS direk in die kern of sitoplasma geïnkorporeer.
Soortgelyk aan elektroporasie, is mikro-inspuiting 'n direkte transformasietegniek. Mikro-inspuiting word onder 'n gespesialiseerde mikroskoopopstelling uitgevoer. Gerekenariseerde beheer van die vashou van pipet, naald, mikroskoop stadium en video tegnologie het die doeltreffendheid van hierdie tegniek verhoog. Wanneer DNA ingespuit word, kan 'n kleurstof gebruik word om getransformeerde selle maklik te identifiseer. Daarom is dit nie nodig om 'n aparte metode te gebruik om getransformeerde selle te identifiseer nie. Die belangrikste is dat die mikro-inspuitingsprosedure nie 'n merkergeen vereis nie.
Figuur 02: Mikro-inspuiting
Boonop is hierdie metode baie effektief en reproduceerbaar. Hierdie metode is egter duur, tydrowend en vereis bekwame persoonlike. Slegs 'n klein aantal selle kan ook met hierdie metode behandel word.
Wat is die ooreenkomste tussen elektroporasie en mikro-inspuiting?
- Beide elektroporasie en mikro-inspuiting is twee tipes transformasietegnieke.
- Hierdie metodes lewer DNA in plantselle en protoplaste.
- Hulle is direkte metodes.
- Boonop is dit fisiese of meganiese metodes.
- Albei metodes is nuttig wanneer transgeniese plante en diere geproduseer word.
Wat is die verskil tussen elektroporasie en mikro-inspuiting?
Elektroporasietegniek gebruik 'n elektriese veld om DNS in te voer, terwyl mikro-inspuitingstegniek 'n mikropipet of 'n fyn puntglasnaald is om DNS in te voer. Dit is dus die belangrikste verskil tussen elektroporasie en mikro-inspuiting. Boonop word elektroporasie meestal vir plantselle en protoplaste gebruik, terwyl mikro-inspuiting meestal vir dierselle gebruik word. Boonop is elektroporasie nie so tydrowend soos mikro-inspuiting nie.
Die onderstaande infografika som die verskille tussen elektroporasie en mikro-inspuiting in tabelvorm op.
Opsomming – Elektroporasie vs Mikro-inspuiting
Elektroporasie en mikro-inspuiting is twee fisiese metodes van geenoordrag. Elektroporasie gebruik 'n hoëspanning elektriese veld terwyl mikro-inspuiting 'n glasnaald of mikropipet gebruik. Dit is dus die belangrikste verskil tussen elektroporasie en mikro-inspuiting. Albei metodes bring egter eksogene DNA direk in gasheerselle in.
