Sleutelverskil – Gramvlek vs Kultuur
Gram-kleuring is 'n kleurtegniek wat uitgevoer word om bakterieë in twee groepe te onderskei volgens die dikte van die peptidoglikaanlaag in hul selwand. Kultuur is 'n metode om mikroörganismes onder laboratoriumtoestande te kweek en te onderhou vir verskillende ontledings. Die belangrikste verskil tussen gram vlek en kultuur is hul funksie; gram-stam 'n kleurtegniek van bakterieë waar kultuur 'n metode is om mikroörganismes te kweek en in stand te hou.
Wat is Gram-vlek?
Gram-kleuring is 'n belangrike differensiële kleurtegniek wat gebruik word vir bakteriese identifikasie in Mikrobiologie. Hierdie tegniek is in 1884 deur die Deense bakterioloog Hans Christian Gram ingestel. Gramkleuring kategoriseer bakterieë in twee hoofgroepe: grampositief en gramnegatief; dit is baie belangrik in bakteriese klassifikasie en identifikasie. Gram-kleuring word as 'n aanvanklike stap vir bakteriese karakterisering uitgevoer.
Bakterieë word gegroepeer op grond van die verskille in hul selwand. Gram-positiewe bakterieë bevat 'n dik peptidoglikaanlaag in hul selwand terwyl Gram-negatiewe bakterieë 'n dun peptidoglikaanlaag in hul selwand bevat soos getoon in figuur 01. Die uitkoms van die gramkleuring sal gebaseer wees op die dikteverskil in die peptidoglikaanlaag van die selwand.
Figuur 1: Gram-positiewe bakterieë en Gram-negatiewe bakterieë
Grams-kleuring word uitgevoer met behulp van vier verskillende reagense, naamlik; primêre vlek, beitsmiddel, ontkleurmiddel en teenvlek. Kristalviolet en safranien dien onderskeidelik as die primêre en teenvlekke, terwyl die gram jodium en 95% alkohol onderskeidelik as die beitsmiddel en ontkleurmiddel dien.
Basiese stappe van gramvlek
- 'n Bakteriese smeer word op 'n skoon glasskyfie voorberei, deur hitte vasgemaak en afgekoel.
- Smeer is oorstroom met kristalviolet vir 1 – 2 minute.
- Smeer word met stadig lopende kraanwater afgespoel om oortollige vlekke te verwyder.
- Grams jodium word vir 1 minuut op die smeer toegedien.
- Smeer word afgespoel met stadig lopende kraanwater
- Smeer word vir 2 – 5 sekondes met 95% alkohol gewas en met stadig lopende kraanwater afgespoel.
- Smeer is teenbevlek met safranien vir 1 minuut
- Smeer word met stadig lopende kraanwater afgespoel, gedroog en onder die mikroskoop waargeneem.
Aan die einde van die gram-vlek sal gram-negatiewe bakterieë in pienk kleur waargeneem word terwyl die gram-positiewe bakterieë in pers kleur waargeneem sal word soos in Figuur 02 getoon. Die uitkoms van die gram-vlek word bepaal deur die dikte van die peptidoglikaanlaag in hul selwand. Tydens die ontkleuringstap word primêre vlek en die beitsmiddel maklik van die gram-negatiewe bakterieë verwyder en word dit kleurloos aangesien hulle 'n dun peptidoglikaanlaag het. Die primêre vlek word in die gram-positiewe bakterieë behou, aangesien hulle 'n dik peptidoglikaanlaag het. Teenvlek sal nie effektief wees vir gram-positiewe bakterieë nie as gevolg van die behoud van die primêre vlek. Dus sal gram-positiewe bakterieë sigbaar wees in primêre vlekkleur, dit wil sê, pers kleur. Teenvlek sal die gram-negatiewe bakterieë vlek en sal sigbaar wees in plukkleur wat die safranienkleur is. Dit is dus maklik om bakterieë in twee groepe te kategoriseer volgens die gram-vlek en dit is waardevol in bakteriese differensiasie en identifikasie.
Figuur 2: Gram-stam
Wat is Kultuur?
Mikrobiese kultuur is 'n metode om mikroörganismes onder laboratoriumtoestande vir verskillende doeleindes te kweek en in stand te hou. Kulture word gekweek in vaste, semi-vaste en vloeibare media gebaseer op die tipe en die doel van die kweek van die mikro-organisme. Kulture word voorsien van nodige voedingstowwe en groeitoestande wat deur die mikro-organismes vereis word. Daar is verskillende komponente van 'n kultuurmedium soos energiebron, koolstofbron, stikstofbron, minerale, mikrovoedingstowwe, water, stolmiddel, ens. Optimum temperatuur, suurstof en pH moet aangepas word volgens die tipe mikro-organisme wat gekweek word.
Daar is verskillende tipes mikrobiese kulture; byvoorbeeld, bondelkultuur, deurlopende kultuur, steekkultuur, agarplaatkultuur, souskultuur, ens. Volgens die samestelling van die groeimedium is daar verskillende tipes kultuurmedia bekend as sintetiese media, semi-sintetiese media en natuurlike media. Mikrobiese kulture word voorberei onder steriele toestande binne 'n spesiale kamer wat laminêre lugvloei genoem word. Groeimedium en die glasware word gesteriliseer voor inenting van die verlangde mikro-organisme. Onder behoorlike steriele toestande word teikenmikro-organismes in die gesteriliseerde voedingsmedium oorgedra en by optimum temperatuur geïnkubeer. Binne-in die medium sal mikro-organismes groei en vermeerder deur die verskafde voedingstowwe te gebruik.
Figuur 3: 'n Bakteriekultuur op plaat
Wat is die verskil tussen Gram-vlek en Kultuur?
Gram Stain vs Culture |
|
| Grams-stam is 'n differensiële kleurtegniek wat gebruik word vir bakteriese differensiasie en identifikasie. | Mikrobiese kultuur is 'n metode om mikro-organismes in die laboratorium te laat groei. |
| Components | |
| Dit gebruik verskillende reagense, insluitend twee vlekke. | Dit gebruik verskillende kultuurmedia soos vaste, halfvaste en vloeibare media wat uit voedingstowwe en ander nodige toestande saamgestel is. |
| Basiese funksies | |
| Dit laat die groepering van bakterieë in twee groepe toe: gram negatief en gram positief. | Dit laat vermenigvuldiging van mikroörganismes vir verskillende doeleindes toe. |
| Basis | |
| Gramvlekuitkoms is gebaseer op die verskille in die peptidoglikaanlaag van die selwand. | Mikro-organismes sal groei en vermeerder binne die kultuurmedia. |
| Uitkoms | |
| Grams-negatiewe bakterieë is sigbaar in pienk kleur en gram-positiewe bakterieë is sigbaar in pers kleur. | Op plate kan kolonies van die mikro-organismes gesien word. Op vloeibare media is mikroörganismes in gesuspendeerde vorm. |
Opsomming – Gramvlek vs Kultuur
Mikrobiese kulture word voorberei en onder laboratoriumtoestande onderhou vir verskillende doeleindes soos berging, toetsing, chemiese suiwering, ens. Gram-kleuring is 'n kleurprosedure wat bakterieë in twee hoofgroepe onderskei wat gram-negatiewe bakterieë en gram-positiewe bakterieë genoem word. Daarom is die verskil tussen die gram-vlek en die kultuur dat gram-kleur 'n kleurtegniek van bakterieë is terwyl die kultuur 'n metode is om mikroörganismes in die laboratoriums te kweek en in stand te hou.
