Sleutelverskil – RNASE A vs RNASE H
Die ribonukleases is nukleases wat spesifiek RNA in kleiner eenhede afbreek. Hulle kan in twee kategorieë verdeel word; endoribonukleases en exoribonukleases. Endoribonuklease is 'n endonuklease wat óf enkelstring óf dubbelstring RNA kan afbreek. Dit klief die fosfodiesterbindings binne 'n RNA-polinukleotiedketting. Die voorbeelde is RNase A, RNase III, RNase T1, RNase P en RNase H. Eksoribonuklease is 'n eksonuklease wat RNA afgebreek het deur terminale nukleotiede van óf 5'end óf 3'end van die RNA molekule te verwyder. Die voorbeelde is RNase R, RNase II, RNase D en RNase PH. Die sleutelverskil tussen RNASE A en RNASE H is dat die RNase A 'n pankreas-ribonuklease is wat spesifiek enkelstring-RNA in kleiner komponente afbreek, terwyl RNase H 'n nie-spesifieke ensiem is wat die RNA in RNA-DNA-hibried in kleiner eenhede klief via die hidrolitiese meganisme.
Wat is RNASE A?
Die RNase A is 'n pankreas-ribonuklease wat spesifiek die ongepaarde sitosien- en urasil-residue aan die 3'-kant van enkelstrengs RNA splits. RNase H werk teen 'n hoër soutkonsentrasie (0.3M of hoër NaCl-konsentrasie). Die hidrolitiese reaksie is twee stappe. Dit vorm 'n 3'-gefosforileerde produk via 2', 3' sikliese monofosfaat-intermediêre. Alhoewel dit spesifiek is vir enkelstring-RNA by hoër soutkonsentrasie, kan dit ook dubbelstring-RNA en RNA in RNA-DNA-baster by laer NaCl-konsentrasie (laer as 0,3M NaCl) afbreek.
Bruce Merrifield het eers hierdie ensiem gesintetiseer. RNase A is 'n baie gewilde ensiem in molekulêre navorsing. Beespankreas RNase A is 'n voorbeeld van RNase A. En dit is een van die gehardste ensieme wat in die laboratorium gebruik word. Hierdie ensiem het nie 'n kofaktor nodig vir sy aktiwiteit nie. Dit is 'n hoogs termostabiele ensiem. RNase A is die eerste ensiem en die derde proteïen waaraan 'n korrekte aminosuurvolgorde opgespoor is. Hierdie ensiem is baie klein met 124 aminosure en molekulêre massa van 12600da. En dit het vier histidienresidu (His 12 en His 119 wat in katalitiese reaksie betrokke is).
Figuur 01: Die RNase A
RNase A kan geïsoleer word deur 'n ru-monster te kook. Wanneer dit kook, breek alle ander ensieme oorblywende RNase A af. RNase A is 'n ongelooflik stabiele ensiem. Hierdie ensiem inhibeer met ribonuklease inhibeerder proteïen, swaarmetaal en uridien vanadaat komplekse.
Wat is RNase H?
Die RNase H is 'n nie-spesifieke ribonuklease-ensiem wat RNA in RNA-DNA-baster kan afbreek via hidrolitiese reaksie. Die RNase H klief die 3'- die O-P binding van RNA in 'n RNA-DNA baster. Uiteindelik produseer dit 3'OH- en 5'-fosfaat-getermineerde produkte. In DNA-replikasie speel dit 'n deurslaggewende rol deur RNA-inleiding te verwyder nadat nuwe DNA-stringe gevorm is. In laboratoriumtoestande degradeer dit spesifiek RNA in RNA-DNA baster maar nie DNA en ongehibridiseerde RNA nie. En hierdie ensiem word gewoonlik gebruik om die RNA-sjabloon te vernietig nadat eerste komplementêre DNA-string gevorm is tydens cDNA-sintese.
Figuur 02: RNase H
RNase H gebruik ook in nukleasebeskermingstoetse. Dit kan ook geïnkorporeer word by die verwydering van poli A stert van mRNA. RNase H het die vermoë om die nie-koderende RNA binne en buite die sel te vernietig. Die metaalione word benodig as kofaktore vir hierdie proteïenaktiwiteit. 'n Chelator (EDTA) kan gebruik word om die RNase H-ensiem te inhibeer.
Wat is die ooreenkomste tussen RNASE A en RNASE H?
- Albei is proteïen van aard.
- Albei is endoribonuklease
- Albei kan RNA afbreek.
- Albei voer hidrolitiese reaksies uit.
- Molekulêre laboratoriums gebruik albei hierdie.
Wat is die verskil tussen RNASE A en RNASE H?
RNASE A vs RNASE H |
|
| RNase A is 'n pankreas-ribonuklease wat spesifiek die 3'-punt van ongepaarde sitosien- en urasil-reste van enkelstring-RNA by hoër soutkonsentrasie splyt. | RNase H is 'n nie-spesifieke ribonuklease-ensiem wat RNA in RNA-DNA-baster kan afbreek via hidrolitiese reaksie. |
| Aard van RNA-klowing | |
| RNase A splits spesifiek enkelstring-RNA by hoër soutkonsentrasie. | RNase H klief RNA in RNA- DNA-baster. |
| Behoefte aan medefaktore vir aktiwiteit | |
| RNase A benodig nie kofaktore vir sy aktiwiteit nie. | RNase H benodig metaalione as kofaktore vir sy aktiwiteit. |
| Inhibeerders van proteïenaktiwiteit | |
| Ribonuklease-inhibeerder-proteïen-, swaarmetaal- en uridienvanadaatkomplekse inhibeer die RNAse A-aktiwiteit. | 'n chelator (EDTA) inhibeer RNase H-aktiwiteit. |
| RNA Primer-verwydering in DNA-replikasie | |
| RNase A word nie gebruik vir die verwydering van RNA-primer in DNA-replikasie nie. | RNase H word gebruik vir RNA-primerverwydering in DNA-replikasie |
| DNA-sjabloonverwydering in komplementêre DNA (C-DNA)-sintese | |
| RNase A word nie gebruik vir RNA-sjabloonverwydering tydens komplementêre DNA (C-DNA) sintese nie. | RNase H word gebruik vir RNA-sjabloonverwydering tydens komplementêre DNA (C-DNA) sintese. |
| Verwydering van poli-A-stert in mRNA wat tot oligo (dt) verbaster is | |
| RNase A word nie gebruik om "poli-A-stert" te verwyder in mRNA wat met oligo (dt) gehibridiseer is nie. | RNase H word gebruik om "poly-A-stert" te verwyder in mRNA wat met oligo (dt) gehibridiseer is |
Opsomming – RNASE A vs RNASE H
Die ribonukleases is nuklease-ensieme wat die vermoë het om RNA in kleiner eenhede te splits. Hulle is twee tipes; endoribonukleases en exoribonukleases. Endoribonuklease is 'n endonuklease wat die vermoë het om enkel- of dubbelstring RNA af te breek. En dit klief die fosfodiesterbinding binne 'n RNA-polinukleotiedketting. RNase A en RNase H is twee endoribonukleases. RNase A is 'n pankreas-ribonuklease wat spesifiek ongepaarde sitosien- en urasilresidue aan die 3'-kant van die enkelstring-RNA by hoër soutkonsentrasie splits. RNase H is 'n nie-spesifieke ribonuklease-ensiem wat RNA in RNA-DNA-baster kan afbreek via hidrolitiese reaksie. Dit is die verskil tussen RNase A en RNase H.
Laai die PDF RNASE A vs RNASE H af
Jy kan die PDF-weergawe van hierdie artikel aflaai en dit vir vanlyn doeleindes gebruik soos per aanhalingsnota. Laai asseblief PDF-weergawe hier af Verskil tussen RNASE A en RNASE H
