Sleutelverskil – Immunofluoressensie vs Immunohistochemie
Siektediagnostiek, wat molekulêre biologiese metodes gebruik, het 'n opkomende gebied van die kliniese laboratoriumtegnologie geword. Dit sluit alle toetse en metodes in om 'n siekte te identifiseer en die oorsaak van 'n siekte te verstaan deur DNA, RNA of uitgedrukte proteïene in 'n organisme te ontleed. Vinnige vooruitgang in molekulêre diagnostiek het basiese navorsing oor oordraagbare en nie-oordraagbare siektes moontlik gemaak. Dit word gebruik om veranderinge in volgorde of uitdrukkingsvlakke in belangrike gene of proteïene wat by siekte betrokke is, te bepaal. Immunofluoressensie (IF) en Immunohistochemie (IHC) is twee sulke wyd gebruikte tegnieke in kankerbiologie. IF is 'n tipe IHC waar 'n fluoressensie-opsporingsmetode gebruik word om monoklonale en poliklonale teenliggaampies te ontleed, terwyl IHC chemiese gebaseerde metodes gebruik om die monoklonale en poliklonale teenliggaampies op te spoor. Dit is die sleutelverskil tussen IF en IHC.
Wat is Immunofluorescence (IF)?
Immunofluoressensie is 'n opsporingstegniek waar die teenliggaampies wat in die toets gebruik word, gemerk word met fluoresserende kleurstowwe of fluoresserende proteïene vir die opsporingsdoel. Gemerkte sekondêre teenliggaampies kan lei tot ongewenste agtergrondseine; daarom is IF-tegniek gebaseer op die etikettering van die primêre teenliggaam self tans ten einde ongewenste seine tydens opsporing te vermy. Deur hierdie tegniek word nie-spesifieke binding tussen die primêre en die sekondêre teenliggaam voorkom, en dit is vinniger aangesien daar geen sekondêre inkubasiestap betrokke is nie. Die datakwaliteit is ook verbeter.
Figuur 01: Dubbele immunofluoressensiekleuring vir BrdU, NeuN en GFAP
Fluorochrome of fluoresserende kleurstowwe is verbindings wat straling kan absorbeer, verkieslik ultraviolet straling wat opgewek word. Wanneer die deeltjies die grondtoestand vanaf die opgewekte toestand bereik, straal hulle straling uit wat deur 'n detektor vasgevang en waargeneem word om 'n spektrum te vorm. Dit is van groot belang dat die fluoresserende etiket versoenbaar en stabiel is vir die spesifieke reaksie en dit moet behoorlik aan die teenliggaam gekonjugeer word om akkurate resultate te verkry. Een van die mees gebruikte fluorochrome is fluoressensie-isotiosianaat (FITC), wat van groen kleur is, met absorpsie- en emissiepiekgolflengtes van onderskeidelik 490 nm en 520 nm. Rhodamine, 'n ander middel wat in IF gebruik word, is rooi van kleur en het duidelike absorpsie- en emissiepiekgolflengtes van 553 nm en 627 nm.
Wat is Immunohistochemie (IHC)?
IHC is 'n molekulêre toetsmetode wat beoefen word om die teenwoordigheid van die antigeen in die teikensel te identifiseer en te bevestig. Die teikensel kan 'n aansteeklike deeltjie, 'n mikrobiese patogeen of 'n kwaadaardige tumorsel wees. IHC gebruik monoklonale en poliklonale teenliggaampies om die teenwoordigheid van antigene op die seloppervlak van die teikenselle te bepaal. Die tegniek is gebaseer op antigeen-teenliggaambinding. 'n Opsporingsmerker word aan hierdie teenliggaampies gekonjugeer om die teenwoordigheid of afwesigheid van die spesifieke antigeen op te spoor. Hierdie merkers kan chemiese merkers soos ensieme, fluorescent gemerkte teenliggaampies of radio-gemerkte teenliggaampies wees.
Figuur 02: Muisbreinskyfie gekleur deur Immunohistochemistry
Die gewildste toepassing van IHC is in kankerselbiologie om die teenwoordigheid van kwaadaardige gewasse te identifiseer, maar dit word ook gebruik vir die opsporing van aansteeklike siektes.
Wat is die ooreenkomste tussen immunofluoressensie en immunohistochemie?
- Immunofluoressensie en Immunohistochemie vind plaas onder in vitro toestande.
- Albei tegnieke is gebaseer op die antigeen-teenliggaam
- Albei is baie vinnige tegnieke.
- Resultate van die tegnieke is reproduseerbaar.
- Albei het datakwaliteit verbeter.
- Hierdie tegnieke wat gebruik word in diagnostiek vir kanker en aansteeklike siektes.
Wat is die verskil tussen immunofluoressensie en immunohistochemie?
Immunofluoressensie vs Immunohistochemie |
|
| IF is 'n opsporingstegniek waar die teenliggaampies wat in die toets gebruik word, gemerk word met fluoresserende kleurstowwe of fluoresserende proteïene vir opsporing. | IHC is 'n opsporingstegniek waar die teenliggaampies wat in die toets gebruik word, gemerk word deur chemikalieë of radioaktiewe elemente vir opsporing te gebruik. |
| Akkuraatheid | |
| Akkuraatheid is hoër in IF-tegniek in vergelyking met IHC. | Akkuraatheid is laer in IHC. |
| Spesifisiteit | |
| IF is meer spesifiek. | IHC is minder spesifiek. |
Opsomming – Immunofluoressensie vs Immunohistochemie
Molekulêre meganismes het baie veranderinge in die veld van medisyne teweeggebring, wat aanleiding gegee het tot gevorderde molekulêre toetsmetodes wat omwentelings in die veld van diagnostiek teweeggebring het. Hierdie uitvindings het gelei tot 'n vinnige en akkurate identifikasie en bevestiging van die siekte, wat die suksesvolle toediening en vervaardiging van geneesmiddels moontlik maak. Hierdie tegnieke word ook in farmakologie gebruik om die teikens van geneesmiddels te vind en om die farmakokinetiese eienskappe van die geneesmiddel tydens geneesmiddelmetabolisme te bevestig. IF en IHC is twee diagnostiese metodes wat gebaseer is op die konsep van antigeen- en teenliggaambinding, hoewel die metode van opsporing in beide tegnieke verskil. IF gebruik die beginsel van fluoressensie om die antigeen op te spoor en IHC gebruik die konsep van chemiese konjugasie om die antigeen op te spoor. Dit is die verskil tussen IF en IHC.
Laai PDF-weergawe van Immunofluorescence vs Immunohistochemistry af
Jy kan die PDF-weergawe van hierdie artikel aflaai en dit vir vanlyn doeleindes gebruik soos per aanhalingsnota. Laai asseblief PDF-weergawe hier af. Verskil tussen immunofluoressensie en immunohistochemie.
