Sleutelverskil – YAC vs BAC-vektore
Vektore word gebruik in molekulêre kloning. 'n Vektor kan gedefinieer word as 'n DNS-molekule wat optree as 'n voertuig om vreemde genetiese materiaal na 'n ander sel in te dra. 'n Vektor wat vreemde DNA bevat staan bekend as rekombinante DNA en dit behoort die vermoë te hê om dit binne die gasheerorganisme te repliseer en uit te druk. Gis kunsmatige chromosoom (YAC) en bakteriese kunsmatige chromosoom (BAC) is twee tipes vektore wat betrokke is by kloning. Die belangrikste verskil tussen YAC en BAC is dat YAC 'n kunsmatig gekonstrueerde vektorstelsel is wat 'n spesifieke streek van gis-chromosoom gebruik om groot segmente van genetiese materiaal in gisselle in te voeg, terwyl BAC 'n kunsmatig gekonstrueerde vektorstelsel is wat 'n spesifieke streek van E gebruik.coli-chromosoom om groot segmente DNA in E. coli-selle in te voeg.
Wat is YAC-vektore?
YAC (Yeast kunsmatige chromosoom) is 'n kunsmatig geboude chromosoom wat die vermoë het om 'n groot segment van vreemde DNA te dra en binne die gisselle te repliseer. Dit het 'n sentromeer, telomere sowel as outonoom repliserende reekse wat noodsaaklik is vir replikasie en stabiliteit. YAC moet ook 'n selektiewe merker of merkers en beperkingsplekke dra om dit 'n effektiewe kloningsvektor te maak. 'n Groot reeks wat wissel van 1000 kb tot 2000 kb kan in YAC ingevoeg word en in gis oorgedra word. Die transformasiedoeltreffendheid van YAC is baie laag.
Figuur 01: YAC Vector
Wat is BAC-vektore?
Bakteriese kunsmatige chromosoom (BAC) is 'n kunsmatig gekonstrueerde chromosoom vir molekulêre kloning. Dit het spesifieke streke van E. coli F-plasmied en dit is sirkelvormig en super opgerol. BAC is ontwikkel om DNA-fragmente na bakterieë te kloneer, veral na E. coli. Dit kan DNS-fragmente met groottes tot 300 kb dra. In vergelyking met YAC, is BAC-kloning-insetsels kleiner in groottes. BAC's is in 1992 ontwikkel en dit is steeds gewild as gevolg van sy stabiliteit en gemak van konstruksie. BAC's is ook nuttig om entstowwe te ontwikkel.
Figuur 02: BAC-vektor in molekulêre kloning
Wat is die verskil tussen YAC- en BAC-vektore?
YAC vs BAC Vectors |
|
| YAC is 'n geneties gemanipuleerde chromosoom met die gebruik van gis-DNA vir die doel van kloning. | BAC is 'n geneties gemanipuleerde DNA-molekule wat E. coli DNA gebruik vir die doel van kloning. |
| Geslag | |
| YAC's is ontwerp om groot fragmente van genomiese DNA in gis te kloneer. | BAC's is ontwikkel vir die kloning van groot genomiese fragmente in Escherichia coli. |
| Invoeglengte | |
| YAC's kan megabasisgrootte genomiese insetsels bevat.(1000 kb – 2000 kb). | BAC's kan insetsels van 200–300 kb of minder dra. |
| Konstruksie | |
| YAC DNA is moeilik om ongeskonde te suiwer en vereis hoë konsentrasie vir die generering van YAC vektorstelsel. | BAC is maklik om ongeskonde te suiwer en kan maklik gebou word. |
| Chimerisme | |
| YAC's is dikwels chimeer. | BAC's is selde chimeer. |
| Stabiliteit | |
| YAC is onstabiel. | BAC is stabiel. |
| Wysigings | |
| Gs-herkombinasie is baie haalbaar en bly altyd aktief. Dit kan dus skrappings en ander herrangskikkings in 'n YAC genereer. | E. coli-rekombinasie word voorkom en word aangeskakel wanneer nodig. Gevolglik verminder dit die ongewenste herrangskikkings in BAC's. |
| Instandhouding | |
| Manipulering van rekombinante YAC's vereis gewoonlik dat YAC na E. coli oorgedra word vir daaropvolgende manipulasie. Daarom is dit 'n moeisame proses. | BAC-modifikasie vind direk in E. coli plaas. Daar is dus geen behoefte aan DNA-oordrag nie. Die proses is dus nie moeisaam nie. |
Opsomming – YAC vs BAC Vectors
YAC het 'n noodsaaklike navorsingsinstrument in kloningsprosesse geword vanweë sy vermoë om groot fragmente DNA in die gasheerorganisme te kloneer. YAC's het egter verskeie nadele as vektore soos konstruksieprobleme, chimerisme, onstabiliteit, ens. Daarom het wetenskaplikes BAC-vektore ontwikkel om hierdie probleme te oorkom. BAC is gekonstrueer deur gebruik te maak van spesifieke streke van E. coli-chromosoom. Dit is 'n stabiele vektor en kan maklik gekonstrueer word. Die lengte van DNA wat BAC kan hanteer, is egter tot 20 keer minder as dié van YAC. Dit is die verskil tussen YAC- en BAC-vektorstelsels. Deesdae word BAC meer verkies bo YAC in die laboratoriums.
