Elektroforese vs Elektroosmose
Fisiese skeidingsmetodes soos filtering, distillasie, kolomchromatografie is nie maklike metodes wanneer dit kom by skeiding van sommige molekules nie. Elektroforese en elektro-osmose is twee ander skeidingstegnieke wat gebruik kan word om gelaaide deeltjies te skei.
Wat is elektroforese?
Elektroforese is 'n tegniek om molekules te skei op grond van hul groottes. Fundamenteel vir hierdie skeiding is die lading van die molekule en hul vermoë om in 'n elektriese veld te beweeg. Dit is die mees algemene en hooftegniek in molekulêre biologie om molekules, veral DNA en proteïene, te skei. Dit word meestal gebruik omdat dit relatief maklik en goedkoop is. Die apparaat vir die elektroforese kan bietjie ingewikkeld wees, en voorbereiding daarvan neem 'n geruime tyd. Maar ons kan maklik 'n elektroforese-apparaat maak van die goed wat ons in die laboratorium het. Elektroforese tegnieke kan wissel na gelang van ons doeleindes. Ons kan eendimensionele elektroforese gebruik vir die skeiding van DNA of proteïen. Tweedimensionele elektroforese word gebruik wanneer meer opgeloste monsters benodig word (soos in die geval van vingerafdruk). 'n Jel word as die ondersteuningsmedium gebruik om die molekules te skei. Hierdie gel kan as plat velle of in buise voorberei word. Die basis van hierdie prosedure is om molekules te skei na gelang van hul bewegingstempo deur 'n jel wanneer 'n elektriese veld voorsien word. Negatief gelaaide molekules soos DNA is geneig om na die positiewe pool te beweeg in hierdie elektriese veld terwyl positief gelaaide molekules geneig is om na die negatiewe pool te beweeg. Twee tipes gels word in elektroforese gebruik as agarose en poliakrielamied. Hierdie twee het verskillende oplossingsvermoëns. Die jel dien as 'n sif om die verskillende groottes van molekules te filtreer. Die elektrostatiese ladings wat in die jel opgestel is, dien as die krag.
Skeiding hang af van die mobiliteit van die ione.
F=fv=ZeE
V=ZeE/ f
F=krag wat op 'n deeltjie inwerk
f=wrywingskoëffisiënt
V=gemiddelde migrasiesnelheid
Z=lading van die migrerende deeltjie
e=elementêre heffing
E=sterkte van die elektriese veld
Die nodige voorwaardes vir die elektroforese is relatief eenvoudig. Wanneer die jel gemaak word en die monster laat loop, word 'n buffer gebruik. Merkers en kleurstowwe word vir die visualiseringsdoeleindes gebruik.
Wat is Elektro-osmose?
Dit is die proses om 'n vloeistof deur 'n materiaal te beweeg deur 'n toegepaste elektriese veld te gebruik. Die beweging kan deur 'n poreuse materiaal, langs 'n kapillêre, membraan ens. Dit kan as 'n skeidingstegniek gebruik word (veral kapillêre elektro-osmose). Die snelheid van die vloeistof is lineêr eweredig aan die toegepaste elektriese veld. Dit is ook afhanklik van die materiaal wat gebruik word om die kanaal te bou en die oplossing wat gebruik word. In die koppelvlak het oplossing en materiaal teenoorgestelde ladings verkry en dit staan bekend as 'n elektriese dubbellaag. Wanneer 'n elektriese veld op die oplossing toegepas word, beweeg die elektriese dubbellaag deur die gevolglike Coulomb-krag. Dit staan bekend as die elektro-osmotiese vloei.
Wat is die verskil tussen Elektroforese en Elektro-osmose?
• In elektroforese word vaste deeltjies (makromolekules soos nukleïensure of proteïene) deur 'n elektriese veld beweeg. Maar in elektro-osmose beweeg 'n vloeistof.
• In elektroforese is die vaste steunmateriaal 'n jel. Maar dit elektro-osmose kan 'n jel, membraan, kapillêre, ens wees.
