Die sleutelverskil tussen GFP en EGFP is dat die GFP 'n wildtipe proteïen is wat in die molekulêre kloning van nie-soogdierselle geïnkorporeer word, terwyl die EGFP 'n verbeterde of gemanipuleerde tipe GFP is wat op soogdierselle gebruik kan word.
Molekulêre kloning is 'n gevorderde tegniek wat wetenskaplikes geweldig gebruik om proteïene via rekombinante tegnologie uit te druk. In rekombinante DNA-tegnologie is dit nodig om rekombinante vektor suksesvol na gasheerorganisme te transformeer. Dus, tydens die transformasieproses, moet dit geïdentifiseer en bevestig word of die geen van belang na die gasheer getransformeer is of nie. Om dit te bepaal, gebruik molekulêre bioloë verskeie tegnieke. Uit daardie tegnieke is een verslaggewergeen. Hierdie verslaggewergene dien as selekteerbare merkers om die korrekte transformante te selekteer. Dus, die Green Fluorescent Protein (GFP) en Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) is twee verslaggewerproteïene wat in molekulêre kloning gebruik word.
Wat is GFP?
GFP is 'n wildtipe proteïen wat 238 aminosuurreste en verskeie kiesbare streke van aminosuurvolgordes bevat wat dit van die ander fluoresserende proteïene onderskei. Verder was hierdie wildtipe proteïen oorspronklik in isolasie van Aequorea Victoria; 'n soort jellievis. In natuurlike verskynsels was die jellievis egter in staat om groen kleur fluoressensie te produseer in reaksie op sekere stimuli.
Vroeër het hierdie konsep die wetenskaplikes verras, en hulle het besluit om dit op hul rekombinante DNA-tegnologie te gebruik. Gevolglik het wetenskaplikes hierdie mutante vorm van die wildtipe geen as 'n verslaggewergeen in hul geenuitdrukkingstudies gebruik. Die wilde-tipe geen van GFP is in staat om 'n proteïen te produseer wat fluoressensie by kamertemperatuur of onder UV-lig gee. Daarom, wanneer dit in die transformante ingevoeg word, druk en produseer dit fluoressensie. As die fluoressensie na die transformasieproses ontstaan, bevestig dit die sukses van die transformasieproses. In eenvoudige woorde, fluoressensie-emissie dui op die suksesvolle transformasie van die vektor wat die geen van belang in die gasheer dra.
Figuur 01: GFP
As gevolg van hierdie rede tree die GFP op as 'n in vivo merker van geenuitdrukking. Tans word genetiese ingenieurstegnieke gebruik om GFP te produseer. Baie verbeterde weergawes van GFP soos EGFP is ook beskikbaar. Dit maak dus doeltreffende gebruik van die GFP in molekulêre kloning en geenuitdrukkingstudies moontlik.
Wat is EGFP?
Enhanced Green Fluorescent Protein of EGFP is 'n verbeterde weergawe van GFP. In eenvoudige woorde kan ons EGFP definieer as 'n gemanipuleerde weergawe van wilde-tipe GFP. Wanneer die wilde-tipe geen van GFP muteer, lewer dit voordelige effekte. Gevolglik laat die gemuteerde geen van GFP die uitdrukking van nuwe karakters toe, en as gevolg daarvan kan ons Verbeterde GFP met verbeterde eienskappe produseer. Verder kan ons mutasies suksesvol in die wilde-tipe GFP geen inbring deur bestraling of chemiese metodes te gebruik. Hierdie gemuteerde gene produseer dan die EGFP, wat meer voordelige eienskappe het.
Figuur 02: EGFP
Die verbeterde eienskappe van EGFP is soos volg;
- In staat om sterker fluoressensieseine uit te stuur.
- Het hoë sensitiwiteit.
- Kan dit op soogdierselle gebruik in plaas van prokariote en ander laervlak-eukariote.
- Verskaf ook verhoogde suiwerheid van die produk.
Daarom, in vergelyking met GFP, is EGFP die voorkeurkeuse vir geenuitdrukkingstudies. Die produk is egter duurder in vergelyking met GFP.
Wat is die ooreenkomste tussen GFP en EGFP?
- GFP en EGFP is twee proteïene wat die vermoë het om groen kleur uit te straal
- Daarom funksioneer albei as verslaggewerproteïene in geenuitdrukkingstudies.
- Dit is ook moontlik om albei te sintetiseer deur rekombinante DNA-tegnologie te gebruik.
- Boonop is dit maklik om hierdie twee tipes verder te muteer om verbeterde vorms te sintetiseer.
Wat is die verskil tussen GFP en EGFP?
Die verslaggewergeen is 'n geen wat heg aan die geen van belang in rekombinante DNS-tegnologie. Dit dui op die suksesvolle transformasie van die rekombinante vektor na die gasheer. Hier is GFP en EGFP twee tipes groen fluorescerende proteïene wat as verslaggewerproteïene werk. Die belangrikste verskil tussen GFP en EGFP is egter dat die GFP 'n wilde tipe is, terwyl EGFP 'n gemanipuleerde weergawe van GFP is. Verder het EGFP meer voordelige eienskappe as GFP. Byvoorbeeld, EGFP produseer sterker fluoresserende lig en is meer sensitief as die GFP. Nog 'n verskil tussen GFP en EGFP is die stelsels waarin ons dit kan gebruik. Nie-soogdierstelsels gebruik GFP terwyl soogdierstelsels EGFP gebruik.
Die onderstaande infografika bied die verskil tussen GFP en EGFP in tabelvorm aan.
Opsomming – GFP vs EGFP
GFP en EGFP is verslaggewerproteïene in molekulêre kloning en geenuitdrukkingstudies. GFP is die wilde-tipe proteïen, wat 'n groen fluoresserende proteïen is. Die proteïen was aanvanklik in isolasie van die jellievis Aequorea victoria. In teenstelling hiermee is EFGP 'n verbeterde vorm van GFP-proteïen. Dit is 'n mutant van die wilde-tipe met verbeterde eienskappe. Daarom het EFGP die hoër seinsterkte en hoër sensitiwiteit. Daarom kan ons dit op soogdiervektore gebruik. Daarteenoor is die gebruik van GFP hoofsaaklik slegs op nie-soogdiervektore. Oor die algemeen is dit die verskil tussen GFP en EGFP.
