Transformasie vs Transfection
Transformasie en transfeksie is twee eenvoudige tegnieke wat gebruik word om 'n vreemde geen in 'n gasheersel in te voer. Hierdie tegnieke hang egter af van die tipe gasheer- of vektorstelsels.
Wat is seltransformasie?
Transformasie is die tegniek wat gebruik word om gene in gis- en bakteriële selle in te voer. Hierdie tegniek veroorsaak gewoonlik oorerflike veranderinge in gene, en dus is die uitdrukking van die geen permanent. Die bakteriële transformasie is die eerste keer in 1928 deur Frederick Griffith ingestel. Toe in die vroeë 1970's, is hierdie tegniek gebruik in E.coli. Tydens die proses van transformasie van E. coli word die selle geweek in yskoue oplossing van CaCl2 Hierdie stap maak E.coli-selle bekwaam. Daarna word die bevoegde selle met die plasmied DNA gemeng en vir 20-30 min op ys geïnkubeer. Dan word 'n kort hitteskok gegee om die oordrag van DNA in die sel moontlik te maak. Laastens word die selle in 'n voedingsbouillon geplaas en by 37 °C vir 60-90 minute geïnkubeer om die plasmiede te vestig. Sodra hierdie stappe suksesvol voltooi is, kan die getransformeerde selle op 'n geskikte medium geplaas word vir voortplanting van selle. Aangesien transformasie as 'n ondoeltreffende tegniek beskou word, mag dit nie gebruik word vir die voorbereiding van kloonbanke nie.
Wat is seltransfeksie?
Transfeksie is 'n metode om 'n vreemde geen, gewoonlik, in soogdierselle in te bring. Daar is twee metodes van transfeksie; naamlik verbygaande transfeksie en stabiele transfeksie. By verbygaande transfeksie is geenuitdrukking vir 'n beperkte tyd beskikbaar; dus veroorsaak die verandering van geen tydelike uitdrukking. Hierdie transfeksiemetode is eenvoudig en vinnig; dus kan dit gereeld gebruik word. Een nadeel van verbygaande transfeksie is die moeilikheid om aansoek te doen vir grootskaalse proteïensintesestelsels.
Tydens stabiele transfeksie word 'n teikengeen in die genoom van die gasheersel geïntegreer, en dus is die geenuitdrukking permanent, anders as die verbygaande transfeksie.
Wat is die verskil tussen Transformasie en Transfeksie?
• Transformasie is die inbring van 'n geen in 'n prokariotiese sel (bakterieë en gis), terwyl transfeksie gewoonlik die inbring van 'n geen in 'n soogdiersel genoem word.
• Transformasie lei tot oorerflike verandering in gene, terwyl transfeksie óf tydelike uitdrukking óf permanente veranderinge in gene tot gevolg kan hê.
