Die sleutelverskil tussen HPLC en UPLC is dat die HPLC voorsiening maak vir die ontleding van deeltjies met hul grootte rondom 5 mikrometer, terwyl UPLC baie kleiner deeltjies rondom 2 mikrometer toelaat.
HPLC en UPLC is beide vloeistofchromatografiese tegnieke wat nuttig is om die komponente van 'n verbinding te skei. Om die verskil tussen HPLC en UPLC te ken, moet ons eers weet wat HPLC is. Dit is omdat UPLC 'n spesiale weergawe van HPLC is en ons dit maklik kan verstaan as ons weet wat HPLC is.
Wat is HPLC?
Die term HPLC staan vir High Performance Liquid Chromatography. Dit is 'n tegniek wat ons kan gebruik om verskillende bestanddele van 'n verbinding te skei. Dit is ook die mees gebruikte tegniek om komponente van 'n mengsel te identifiseer, te kwantifiseer en te skei. Boonop gebruik hierdie tegniek 'n hoë druk om oplosmiddels deur die kolom te druk. Verder is die belangrikste toepassings van HPLC in biochemie vir die ontleding van bestanddele van 'n verbinding. Dit is 'n ideale manier vir skeiding en identifikasie van aminosure, nukleïensure, proteïene, koolwaterstowwe, plaagdoders, koolhidrate, antibiotika, steroïede en talle ander anorganiese stowwe.
Figuur 01: HPLC-stelsel in 'n laboratorium
In kort, die metode van werking van die HPLC-tegniek is soos volg. Eerstens moet ons die monster in die stroom van mobiele fase in diskrete klein hoeveelhede inbring met behulp van 'n pomp. Die pompdruk moet op 40 MPa gehandhaaf word. Dan sipel hierdie stroom mobiele fase deur die kolom van HPLC. Die komponente in die monster gaan ook deur die kolom. Hul spoed van beweging verskil egter van mekaar. Hierdie verskil ontstaan as gevolg van die verskil in die interaksies tussen die monsterkomponente en die adsorbens binne die kolom. Ons noem hierdie adsorbent as die stilstaande fase omdat dit binne die kolom woon (nie beweeg nie). Tweedens, aan die einde van die kolom, kan ons die monster wat uit die kolom elueer, versamel. Daar kan ons die verskille in retensietye vir elke komponent in die steekproef bepaal.
Wat is UPLC?
Die term UPLC staan vir Ultra High-Performance Liquid Chromatography. Dit is 'n variasie van HPLC, maar die metode van werking is dieselfde. Maar, anders as HPLC, laat hierdie metode toe om baie klein deeltjies te ontleed, soos 2 mikrometer klein deeltjies.
Figuur 02: 'n UPLC-toestel
Boonop bied dit 'n vinniger ontleding. In hierdie tegniek gebruik ons 'n 100 MPa pompdruk vir die invoeging van die monster in die kolom. Gevolglik bevestig hierdie hoë druk dat die hele monster in die kolom ingebring word. Dit is dus baie doeltreffend in vergelyking met HPLC.
Wat is die verskil tussen HPLC en UPLC?
Die term HPLC staan vir High Performance Liquid Chromatography terwyl die term UPLC staan vir Ultra High Performance Liquid Chromatography. Daarom is die UPLC-tegniek 'n ontwikkelde weergawe van HPLC. Die metode van werking is dus dieselfde vir beide tegnieke. UPLC is egter meer doeltreffend in vergelyking met HPLC omdat dit 'n hoë pompdruk gebruik; die pompdruk vir HPLC is 40 MPA terwyl dit 100 MPa vir UPLC is. Daarom is dit 'n verskil tussen HPLC en UPLC. Die belangrikste verskil tussen HPLC en UPLC is bowenal dat die HPLC die ontleding van deeltjies met hul grootte rondom 5 mikrometer toelaat, terwyl UPLC baie kleiner deeltjies rondom 2 mikrometer toelaat.
Opsomming – HPLC vs UPLC
UPLC is 'n vorm van HPLC. Die operasiemetodes is dus dieselfde. Maar ons kan 'n paar verbeterde kenmerke in UPLC vind in vergelyking met HPLC. Daarom is daar 'n mate van verskil tussen HPLC en UPLC. Die belangrikste verskil tussen HPLC en UPLC is egter dat die HPLC die ontleding van deeltjies met hul grootte rondom 5 mikrometer toelaat, terwyl die UPLC baie kleiner deeltjies rondom 2 mikrometer toelaat.
