Sleutelverskil – HPLC vs HPTLC
Die sleutelverskil tussen HPLC en HPTLC is dat HPLC kwantitatiewe skeiding van komponente in 'n monster toelaat, terwyl HPTLC nie kwantitatiewe skeiding van komponente in 'n monster toelaat nie.
Chromatografie is 'n fisiese skeidingsmetode wat gebruik word om die komponente in 'n mengsel te skei en te identifiseer. Beide HPLC en HPTLC is chromatografiese tegnieke. HPLC is hoë werkverrigting vloeistofchromatografie. HPTLC is hoëwerkverrigting dunlaagchromatografie.
Wat is HPLC?
HPLC is hoëprestasie vloeistofchromatografie. Dit is 'n analitiese tegniek wat gebruik word om komponente in 'n mengsel te skei, te identifiseer en te kwantifiseer. In hierdie tegniek word die monster in 'n geskikte oplosmiddel opgelos. Dan word die oplosmiddel met die monster deur 'n pomp met 'n gegewe druk gevoer. Die pomp is gevul met soliede adsorberende materiaal. Dan bind sommige komponente sterk aan die absorberende materiaal terwyl ander komponente losweg bind. Dit veroorsaak dat die komponente verskillende vloeitempo's deur die pomp het. Daarom kan die komponente maklik geskei word.
Figuur 01: 'n HPLC-stelsel
Die adsorberende materiaal wat die pomp vul, staan bekend as die stilstaande fase. Die oplosmiddel met die opgeloste monster staan bekend as die mobiele fase. Die pomp wat in hierdie tegniek gebruik word, word die kolom genoem. Die kolom is gevul met 'n adsorberende materiaal, mees algemeen, silika-deeltjies. Die grootte van hierdie deeltjies kan wissel van 2-50 μm. Die skeidingsproses word beïnvloed deur die samestelling van die mobiele fase en die temperatuur van die stelsel. Die interaksies tussen die stilstaande fase en die komponent in die monster kan hidrofobiese interaksies, dipool-dipool interaksies, ioniese binding, ens.wees.
Die werksdruk van die HPLC is aansienlik hoër as dié van die tradisionele vloeistofchromatografie. Dit lê ongeveer 50-350 bar. Die verskil tussen vloeistofchromatografie en HPLC is dat in vloeistofchromatografie, die monster deur die kolom val onder swaartekrag, terwyl, in HPLC, die monster deur die kolom onder druk geplaas word. Die grootte van die kolom en die absorberende deeltjies is ook baie klein in vergelyking met die tradisionele vloeistofchromatografie. Die resolusie wat deur die HPLC-tegniek gegee word, is egter beter.
Wat is HPTLC?
HPTLC is hoëwerkverrigting dunlaagchromatografie. Dit is die gevorderde en outomatiese vorm van tradisionele TLC. Hierdie tegniek bied 'n doeltreffende oplossing op 'n kort tydperk. In hierdie metode van ontleding kan die monster en 'n verwysing op dieselfde tyd ontleed word, wat dit moontlik maak om die monster met die verwysing te vergelyk. Dit gee 'n verbeterde analitiese akkuraatheid as ander chromatografiese tegnieke. Die tyd wat dit vir die ontleding neem is minder. Die tegniek is 'n laekoste-tegniek.
Figuur 02: 'n Ontleding van voedselkleurstowwe met behulp van HPTLC
Die HPTLC-metode is 'n eenvoudige proses, en die monstervoorbereidingstap word ook uitgeskakel (In tradisionele TLC word die monstervoorbereidingstap voor die skeiding ingesluit. Hierdie stap behels skoonmaak en verryking). Die oplosmiddel kan direk gebruik word sonder enige voorbehandeling, alhoewel ander chromatografiese tegnieke voorafbehandelings vereis soos ontgassing, filtrasie, ens.
Die adsorberende materiaal wat in HPTLC gebruik word, is silika met baie klein deeltjiegroottes. In tradisionele TLC is die deeltjiegrootte van silika 5-20 μm, terwyl dit in HPTLC 4-8 μm is. Die monster word met 'n toediener op die HPTLC-plaat toegedien. Dit gee 'n eenvormige en veilige toediening. Dan word die plate in 'n kamer met die mobiele fase geplaas. Die kamer moet versadig wees met die damp van die mobiele fase. Na die HPTLC-proses kan die kolle wat beweeg het opgespoor word. Wanneer die kolle op die plaat opgespoor word, gebruik HPTLC-tegniek 'n geskikte UV-streek of 'n jodiumkamer.
Wat is die verskil tussen HPLC en HPTLC?
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC is hoëwerkverrigting vloeistofchromatografie. | HPTLC is hoëwerkverrigting dunlaagchromatografie. |
| Tegniek | |
| In HPLC word die mobiele fase met die oplosmiddel deur 'n kolom gevoer wat met die stilstaande fase gevul is. | In HPTLC word die monster op 'n TLC-plaat gevlek en binne 'n kamer geplaas wat die mobiele fase bevat; dan word die monster toegelaat om die plaat opwaarts te migreer saam met die mobiele fase. |
| Measurement | |
| In HPLC word die verskille tussen vloeitempo's van komponente deur die kolom gebruik om die komponente in die monster te skei. | In HPTLC word die verskille tussen afstande afgelê deur elke komponent in die monster gebruik om die komponente in die monster te skei. |
| Kwantitatiewe skeiding | |
| HPLC laat kwantitatiewe skeiding van komponente in 'n monster toe. | HPTLC laat nie kwantitatiewe skeiding van komponente in 'n monster toe nie. |
Opsomming – HPLC vs HPTLC
HPLC en HPTLC is twee chromatografiese tegnieke. Die sleutelverskil tussen HPLC en HPTLC is dat HPLC kwantitatiewe skeiding van komponente in 'n monster toelaat, terwyl HPTLC nie kwantitatiewe skeiding van komponente in 'n monster toelaat nie.
