Sleutelverskil – HPLC vs LCMS
Kom ons kyk eers na die betekenis van HPLC en LCMS voordat ons die verskil tussen HPLC en LCMS ontleed. Chromatografie is 'n skeidingstegniek in chemiese analise waar monsterbestanddele geskei word tydens deurgang deur 'n chromatografiese medium. Dit behels ook interaksie met die monster, stilstaande fase en mobiele fase. HPLC staan vir High Performance Liquid Chromatography, en dit word as 'n vloeistofchromatografiemetode in analitiese chemie gebruik. Die kombinasie van vloeistofchromatografie en massaspektroskopie (LCMS) is ontwikkel vir die kwantitatiewe ontleding van geselekteerde biomolekules en dit is 'n hoogs sensitiewe, akkurate en spesifieke toetsprosedure in vergelyking met HPLC. Dit is die belangrikste verskil tussen HPLC en LCMC. Hierdie artikel sal jou bekendstel aan HPLC en LCMC wat oor chemiese analise handel en die verskille tussen HPLC en LCMS bespreek.
Wat is HPLC?
Hoogprestasie vloeistofchromatografie (HPLC) is 'n gewilde skeidingstegniek in analitiese chemie. Dit word hoofsaaklik gebruik om die komponente te skei, om elke komponent in 'n mengsel te identifiseer en te kwantifiseer. Vroeër was hierdie metode bekend as hoëdruk vloeistofchromatografie omdat dit van pompe afhanklik was om 'n onder druk staande vloeibare oplosmiddel wat die monstermengsel bevat deur 'n kolom gepak met 'n soliede adsorberende materiaal te laat vloei. Elke bestanddeel in die monstermengsel wissel verskillend met die vaste adsorberende materiaal, wat verskillende vloeitempo's vir verskillende bestanddele tot gevolg het. Dit kan lei tot die skeiding van die bestanddele soos hulle uit die HPLC-kolom vloei.
HPLC is gebruik vir verskeie toepassings soos ontleding van vitamien D-vlakke in bloed, onwettige dwelmgebruik deur atlete deur die dwelmresidu in hul urine op te spoor, die bestanddele van 'n komplekse biologiese monster uit te sorteer vir navorsingsdoeleindes en ontleding en vervaardiging van farmaseutiese produkte.
Wat is LCMS?
Vloeistofchromatografie–massaspektrometrie (LCMS) is 'n analitiese tegniek wat die fisiese skeidingsvermoëns van vloeistofchromatografie kombineer met die massa-ontledingsvermoëns van massaspektrometrie (MS). Vloeistofchromatografie is 'n skeidingstegniek, en massaspektrometrie word gebruik om die massa-tot-lading-verhouding van gelaaide deeltjies te ontleed. Die fisiese skeiding word gewoonlik bereik deur HPLC en alternatiewelik, LCMS ook bekend as HPLC-MS. LCMS is 'n dominante analitiese tegniek wat 'n baie hoë akkuraatheid, sensitiwiteit en spesifisiteit het in vergelyking met HPLC. Dit is dus nuttig in baie toepassings soos navorsingsdoeleindes, geneesmiddelanalise, voedselanalise, ens. LCMS word hoofsaaklik gebruik om biochemiese eienskappe van 'n spesifieke monster te skei, op te spoor, te identifiseer en te kwantifiseer in die teenwoordigheid van komplekse chemiese mengsels.
Wat is die verskil tussen HPLC en LCMC?
Akroniem en definisie van HPLC en LCMC
HPLC: HPLC staan vir High-Performance Liquid Chromatography. Dit is 'n skeidingstegniek wat hoofsaaklik gebruik word om die komponente te skei, om elke komponent in 'n mengsel te identifiseer en te kwantifiseer.
LCMS: LCMS staan vir Liquid Chromatography and Mass Spectrometry. Dit is 'n analitiese tegniek wat die fisiese skeidingsvermoëns van vloeistofchromatografie kombineer met die massa-ontledingsvermoëns van massaspektrometrie (MS).
Kenmerke van HPLC en LCMC
Klassifikasie
HPLC: Dit is slegs 'n vloeistofchromatografie-metode.
LCMS: Dit is 'n kombinasie van vloeistofchromatografie-metode en massaspektrometrie-metode.
Doeltreffendheid
HPLC: In vergelyking met LCMS, is die HPLC-analise minder doeltreffend en stadiger.
LCMS: In vergelyking met HPLC, is die LCMS-analise doeltreffend en vinniger.
Sensitiwiteit
HPLC: In vergelyking met LCMS, is die HPLC-analise minder sensitief.
LCMS: In vergelyking met HPLC, is die LCMS-analise meer sensitief.
Spesifisiteit
HPLC: In vergelyking met LCMS, is die HPLC-analise minder spesifiek.
LCMS: In vergelyking met HPLC, is die LCMS-analise meer spesifiek.
Akkuraatheid
HPLC: HPLC gee minder akkurate resultate as LCMS vir die bepaling van sommige chemikalieë.
LCMS: LCMS gee meer akkurate resultate as HPLC vir die bepaling van sommige chemikalieë.
komponent
HPLC: HPLC kan as 'n komponent van LCMS beskou word.
LCMS: LCMS kan nie as 'n komponent van HPLC beskou word nie.
Ioonbron
HPLC: Ioonbron bestaan nie in HPLC-instrument nie.
LCMS: Ioonbron is teenwoordig in LCMS-instrument.
Aansoeke
HPLC: Ione, polimere, organiese molekules en biomolekules kan met HPLC ontleed word.
LCMS: Organiese molekules en biomolekules kan ontleed word. In teenstelling met HPLC, kan LCMS gebruik word om onvolledig opgeloste mengsels te ondersoek.
Operasie
HPLC: Die diagram van 'n HPLC-instrument word in figuur 1 gegee, en dit sluit gewoonlik 'n outo-monsternemer, pompe en 'n detektor in. Die monsternemer bring die monstermengsel in die mobiele fase (onder druk staande mengsel van oplosmiddels soos water, asetonitril en/of metanol) wat dit na die kolom oordra. Die pompe lewer die verlangde vloei en samestelling van die mobiele fase deur die kolom. Die kolom is gevul met die adsorbens, wat 'n korrelrige vaste deeltjie soos silika of polimere is. Die detektor produseer 'n sein wat eweredig is aan die hoeveelheid monsterbestanddele in die kolom, wat dus vir kwantifiseerbare ontleding van die geselekteerde monsterbestanddele moontlik maak. Die HPLC-instrument word beheer, en data-analise word verskaf deur 'n digitale mikroverwerker en gebruikerssagteware.
Figuur 1: Diagram van HPLC-instrument
LCMS: Die diagram van LCMS-instrument word in figuur 2 gegee. Die monsteruittreksel word in die kolom wat uit HPLC bestaan, ingevoeg. Hierdie kolom behou monstermetaboliete gebaseer op fisiese karakters, en verskillende metaboliete vloei na die massaspektrometer op verskillende tydintervalle. Massaspektroskopie word gebruik vir die assessering van massas deeltjies, vir die bepaling van die elementêre rangskikking van 'n molekule, en om die molekulestrukture te verduidelik. Die monster moet egter geïoniseer word om gelaaide molekules te genereer om hul massa-tot-lading-verhoudings te bepaal. Daarom, in plaas van HPLC-instrumente, bestaan LCMS bykomende drie modules soos ysterbron, 'n massa-ontleder en 'n detektor. 'n Ioonbron kan gasfasemonster in ione omskep en 'n massaontleder wat die ione volgens hul massas groepeer deur elektromagnetiese velde te gebruik. Laastens, 'n detektor kwantifiseer die waardes en lewer data van elke ioon wat in die monster teenwoordig is. Die LCMS-tegniek kan vir beide kwalitatiewe en kwantitatiewe toepassings gebruik word.
Figuur 2: Diagram van LCMS-instrument
Ter afsluiting, HPLC is 'n vloeistofchromatografiemetode terwyl LCMS 'n kombinasie van vloeistofchromatografie en massaspektrometrie is. Beide hierdie ontledingstegnieke het verskillende kenmerke, maar hulle kan gebruik word om voedselsamestellings, farmaseutiese middels en ander bioaktiewe molekules te identifiseer en te kwantifiseer.
