Die sleutelverskil tussen EcoRI- en HindIII-beperkingsensieme is dat EcoRI 'n tipe II-restrictie-ensiem is wat van E. coli geïsoleer is, terwyl HindIII 'n tipe II-restrictie-ensiem is wat geïsoleer is van Haemophilus influenza.
Beperkingsensiem of beperking-endonuklease is 'n ensiem wat DNS in fragmente klief by spesifieke herkenningsplekke (beperkingsplekke) binne die DNS-molekule. Hierdie beperkingsensieme word in bakterieë en archaea aangetref. Hulle bied 'n verdedigingsmeganisme teen indringer virusse. Beperkingsensieme word oor die algemeen in vyf verskillende tipes geklassifiseer: tipe I, tipe II, tipe III, IV en tipe V. EcoRI en HindIII is twee restriksie-ensieme wat aan die groep tipe II-restriksie-ensieme behoort.
Wat is EcoRI-beperkingsensieme?
EcoRI is 'n tipe II beperkingsensiem wat van E.coli spesies geïsoleer is. Dit is 'n beperkingsensiem wat DNS-dubbelhelikse in fragmente op spesifieke plekke klief. EcoRI is ook deel van die beperking-modifikasiestelsel. EcoRI was die eerste ensiem wat oorspronklik uit die RY13-stam van die E. coli spesie geïsoleer is. Dit word as 'n beperkingsensiem in molekulêre biologie gebruik. EcoRI skep 4 kleefpunte van nukleotied met 5'-einde oorhange van AATT. EcoRI sny die DNA by die spesifieke herkenningsvolgorde G↓AATTC. Dit het die palindromiese komplementêre volgorde van CTTAA↓G. Boonop behoort hierdie beperkingsensiem aan die tipe II P (palindromiese spesifisiteit) subklas. In sy primêre struktuur bevat EcoRI die PD. D/EXK-motief binne sy aktiewe terrein, soos baie ander beperkingsensieme.
Figuur 01: EcoRI
EcoRI-beperkingsensiem is 'n homodimeer van 'n 31 kDa. Dit bevat een bolvormige domein van die α/β-argitektuur. Elke subeenheid bevat 'n lus wat uit die globulêre domein uitsteek en om die DNA draai wanneer dit gebind word. Hierdie ensiem kan saam gekristalliseer word met die volgorde wat dit normaalweg sny. Verder word die EcoRI-beperkingsensiem in 'n wye verskeidenheid molekulêre genetiese tegnieke gebruik, insluitend kloning, DNA-sifting en delesie-afdelings van DNA in vitro toestande.
Wat is HindIII-beperkingsensieme?
HindIII is 'n tipe II-beperkingsensiem wat van Haemophilus influenza spesies geïsoleer is. Dit klief die DNA palindromiese volgorde AACCTT in die teenwoordigheid van die kofaktor Mg2+ deur hidrolise. Die splitsing van hierdie spesifieke volgorde tussen die AA'S (5'A↓ACCTT3' en 3'TTCGA↓A5') lei tot 5' oorhange op die DNA-molekule wat klewerige punte genoem word. Hierdie ensiem word in prokariotiese organismes soos bakterieë aangetref. Bakterieë gebruik hierdie ensiem as 'n verdedigingsmeganisme teen virusse soos bakteriofage.
Figuur 02: HindIII
Struktuurgewys is HindIII 'n homodimeer. Dit bevat 'n gemeenskaplike strukturele kern wat bestaan uit vier β-velle en 'n enkele α-helikse, soos ander tipes II-beperkingsensieme. Die molekulêre massa van hierdie ensiem is 34,9 kDa. Verder is HindIII baie nuttig in moderne molekulêre biologiese wetenskap-eksperimente soos DNA-volgordebepaling en kartering.
Wat is die ooreenkomste tussen EcoRI- en HindIII-beperkingsensieme?
- EcoRI en HindIII is twee restriksie-ensieme wat aan die tipe II-restriksie-ensiemgroep behoort.
- EcoRI en HindIII is in die vroeë 1970's gevind.
- EcoRI en HindIII bevat albei die PD.. D/EXK-aminosuurvolgordemotief.
- Albei beperkingsensieme voer baie spesifieke klowing van die DNA uit.
- Hierdie beperkingsensieme benodig Mg2+ as 'n kofaktor vir hul spesifieke aktiwiteit.
- Hulle produseer taai punte nadat DNA gesny is.
- Hulle is baie nuttige komponente in moderne molekulêre biologiese navorsing.
Wat is die verskil tussen EcoRI- en HindIII-beperkingsensieme?
EcoRI is 'n tipe II beperkingsensiem wat geïsoleer is van E.coli spesies, terwyl HindIII 'n tipe II beperking ensiem is wat geïsoleer is van Haemophilus influenza spesies. Dit is dus die belangrikste verskil tussen EcoRI en HindIII. Verder sny EcoRI die DNS by die spesifieke herkenningsvolgorde G↓AATTC, terwyl HindIII die DNS by die spesifieke herkenningsvolgorde A↓ACCTT sny.
Die onderstaande infografika bied die verskille tussen EcoRI en HindIII in tabelvorm aan vir vergelyking langs mekaar.
Opsomming – EcoRI vs HindIII-beperkingsensieme
EcoRI en HindIII is twee beperkingsensieme wat aan die tipe II p-subklas behoort. Hulle voer baie spesifieke splitsing van die DNA uit. EcoRI is 'n tipe II beperkingsensiem wat geïsoleer is van E.coli spesies, terwyl HindIII 'n tipe II beperking ensiem is wat geïsoleer is van Haemophilus influenza spesies. So, dit som die verskil tussen EcoRI en HindIII op.
